[發明專利]一種提高L-色氨酸產量的發酵工藝

在審

• 申請號: 201710188351.3
• 申請日: 2017-03-27
• 公開（公告）號: CN108660168A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發明（設計）人: 李繼安;林惠敏;宋樂;何強;徐魯;夏愛坤;汪玉真;劉坤;張建斌;李亞軍
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: C12P13/22
• 分類號: C12P13/22;C12R1/19
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;余化鵬

1.一種提高L-色氨酸產量的發酵工藝，其特征在于，其包括如下步驟：將L-色氨酸的生產菌種置于含有基礎發酵培養基的機械攪拌發酵罐中進行發酵，在發酵過程攪拌，攪拌轉速為375轉/分～600轉/分，發酵過程中補料，至發酵結束；所述的機械攪拌發酵罐包含攪拌槳，相對標準攪拌槳的尺寸，所述的攪拌槳的尺寸：外直徑尺寸增加100％～165％，槳葉的長度尺寸增加25％～150％。

2.如權利要求1所述的發酵工藝，其特征在于，所述外直徑尺寸增加150％；

和/或，所述槳葉的長度尺寸增加50％；

和/或，所述的攪拌槳的槳葉寬度為寬度尺寸增加10％～65％，較佳地為寬度尺寸增加13％。

3.如權利要求1所述的發酵工藝，其特征在于，所述的機械攪拌發酵罐為25L的機械攪拌發酵罐，攪拌槳的尺寸如下述任一：

槳A：外直徑13.89cm，槳葉長3.87cm，槳葉寬2.19cm，內直徑2.18cm；

槳B：外直徑12.00cm，槳葉長4.86cm，槳葉寬2.47cm，內直徑2.18cm；

槳C：外直徑12.64cm，槳葉長3.24cm，槳葉寬2.19cm，內直徑2.18cm；

槳D：外直徑14.47cm，槳葉長6.12cm，槳葉寬3.56cm，內直徑2.18cm。

4.如權利要求1所述的發酵工藝，其特征在于，所述的攪拌槳是可拆卸的；

和/或，所述的攪拌轉速為400轉/分～500轉/分，較佳地為420轉/分～460轉/分。

5.如權利要求1所述的發酵工藝，其特征在于，所述L-色氨酸的生產菌種為大腸桿菌(Escherichia coli)，較佳地為中國工業微生物菌種保藏管理中心銷售的大腸桿菌基因工程菌(Escherichia coli)CICC 20658。

6.如權利要求5所述的發酵工藝，其特征在于，所述的L-色氨酸的生產菌種在進行發酵前進行菌種的斜面培養與種子培養；

所述的斜面培養所用的培養基為斜面培養基；

所述的斜面培養基為：每升含胰蛋白胨10.0g，酵母浸出粉5.0g，氯化鈉5.0g，瓊脂20.0g，pH7.0～7.2，在使用前進行121℃滅菌15min；

所述的斜面培養的培養條件為：溫度35.0℃，培養周期24h；

所述的種子培養所用的培養基為種子培養基；

所述的種子培養基為：每升含葡萄糖30.0g，酵母浸出粉1.5g，(NH₄)₂HPO₄ 2.5g，KCl1.5g，MgSO₄ 1.6g，檸檬酸鈉1.6g，(NH₄)₂SO₄ 1.2g，FeSO₄.7H₂O 2.8mg，MnSO₄.H₂O 1.2mg，維生素B₁ 1.3mg，生物素0.3mg，pH6.8～7.1，在使用前進行121℃滅菌20min；

所述的種子培養的培養條件為：溫度36℃，培養周期10～12h，pH6.8～7.1。

7.如權利要求5所述的發酵工藝，其特征在于，所述的L-色氨酸的生產菌種的基礎發酵培養基中的氮源為質量比7：5的酵母粉和蛋白胨；所述的基礎發酵培養基較佳地還包含0.5g/L的乙酸鋅。