[發(fā)明專利]抗真菌肽及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710188194.6
• 申請日: 2017-03-27
• 公開（公告）號: CN108660120B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 付鈺;連憲強(qiáng);周利艷
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;A61K38/44;A61P31/10;A01N63/50;A23L3/3463
• 代理公司: 北京信慧永光知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11290
• 代理人: 朱學(xué)珺;董世豪

本發(fā)明涉及一種抗真菌肽及其在抑制真菌生長方面的用途。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抗真菌肽及其在抑制真菌生長方面的用途。

背景技術(shù)

抗菌肽(antimicrobial peptides，AMPs)是一類廣泛存在于整個生物界的多肽。本領(lǐng)域已知的是，抗菌肽可作為植物、昆蟲或哺乳動物免疫系統(tǒng)的一部分，抵抗病原微生物的入侵。抗菌肽具有抗菌譜廣、分子量小、熱穩(wěn)定性和水溶性好、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)。在許多致病菌對現(xiàn)有的抗生素產(chǎn)生明顯耐藥性的情況下，抗菌肽的發(fā)現(xiàn)和研究為開發(fā)新的抗菌藥物提供了可能。

雖然近年來抗真菌肽的研究取得了很大的進(jìn)展。然而，由于真菌與真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的相似性，一些抗真菌肽(例如植物防御素)在抑制真菌生長的同時對包括哺乳動物細(xì)胞在內(nèi)的一些真核細(xì)胞也會產(chǎn)生毒性。因此，本領(lǐng)域仍存在提供安全有效的抗真菌肽的需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的發(fā)明人在研究釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)DNA損傷信號的細(xì)胞間傳遞中發(fā)現(xiàn)，一個短肽介導(dǎo)凋亡過程中酵母細(xì)胞間信號的傳遞。進(jìn)而，借助高分辨液質(zhì)聯(lián)用質(zhì)譜分析和生物信息學(xué)技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，該短肽具有如SEQ ID NO：1所示的序列。實(shí)驗(yàn)證明，該短肽能夠殺死真菌或抑制真菌生長，且不影響哺乳動物細(xì)胞的正常功能，因此具有作為抗真菌藥物的潛力。

在第一方面，本發(fā)明提供了具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的抗真菌肽、其功能片段、功能變體或衍生物。

在第二方面，本發(fā)明提供了一種抗真菌組合物，所述抗真菌組合物包含第一方面所述的抗真菌肽。

在第三方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的抗真菌肽或如第二方面所述的抗真菌組合物在殺死真菌和抑制真菌生長方面的用途；或者，如第一方面所述的抗真菌肽或如第二方面所述的抗真菌組合物在制備用于預(yù)防或治療受試者中的真菌感染的藥物方面的用途。

在第四方面，本發(fā)明涉及將如第一方面所述的抗真菌肽或如第二方面所述的抗真菌組合物用于預(yù)防和/或治療真菌感染。

附圖說明

圖1為根據(jù)實(shí)驗(yàn)例1，加入不同濃度的SP肽培養(yǎng)24h后的新生隱球菌培養(yǎng)液的OD₆₀₀。誤差棒表示三個獨(dú)立樣品測試結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差。

圖2為根據(jù)實(shí)驗(yàn)例2，利用CK肽(4μM)和SP肽(4μM)對新生隱球菌進(jìn)行處理后的PI染色的流式細(xì)胞術(shù)統(tǒng)計結(jié)果。誤差棒表示三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差。PI染色％為PI陽性細(xì)胞的百分比。***表示P<0.001。

圖3為根據(jù)實(shí)驗(yàn)例3，經(jīng)Cytofix/Cytoperm^TM、SP肽或CK肽處理的哺乳動物細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)的分析結(jié)果。

圖4為根據(jù)實(shí)驗(yàn)例4，溶血度隨SP肽濃度變化的結(jié)果。

圖5示出根據(jù)實(shí)施例3建立的Tdh1和Yca1復(fù)合物的結(jié)構(gòu)。其中，CAA89343對應(yīng)于Tdh1，NP_014840對應(yīng)于簡化的Yca1。

圖6示出根據(jù)實(shí)施例3，對全長的Tdh1的生物信息學(xué)分析的結(jié)果。下劃線標(biāo)記氨基酸為Yca1作用于Tdh1的位點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

抗真菌肽

本發(fā)明的抗真菌肽(以下簡稱為SP肽)具有如下的氨基酸序列：

IRIAINGFGRIGRLVLRLALQRKDIEVVA(SEQ ID NO：1)。

生物信息學(xué)分析表明，SP肽的功能片段可具有如下的任一種序列：

IRIAINGFGR(SEQ ID NO：2)；