[發明專利]一種雜交構樹組織培養快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201710188128.9
• 申請日: 2017-03-27
• 公開（公告）號: CN107125132A
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發明（設計）人: 唐慶樂;羅墩;陳婉霞
• 申請（專利權）人: 河池樂康生態農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司11340
• 代理人: 但玉梅

1.一種雜交構樹組織培養快速繁殖方法，其特征在于，具體包括如下步驟：

(一)組織培養階段

1)外植體的消毒：取雜交構樹新長出的嫩芽作為外植體后，用生汞0.1％浸泡3-5分鐘，浸泡過程中不斷振蕩，浸泡后用無菌水沖洗3-4次，然后放置無菌接種盤在超凈工作臺上，將外植體表面的水分吹干，切去在消毒過程中壞死的周邊組織，在超凈工作臺上將葉片用經過滅菌消毒手術刀切割成0.5-2cm小片待用；

2)培養基的培養：

①外植體誘導培養：將經步驟1)處理所得外植體接種于誘導培養基上培養，經過暗處理48小時后，在光照強度1300-1500lx，光照時間為12-14h/d，溫度為22-25℃，PH值為5.6-5.8的條件下培養28-33天；

所述誘導培養基的成分為：MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA；

②繼代增殖培養：將經過步驟①誘導培養的構樹苗徑段上的個腋芽切下，將腋芽接種到增殖培養基上進行繼代增殖培養，于光照強度為1800-2200lx，光照時間為12-14h/d，溫度為21-25℃，PH值為5.6-5.8的條件下培養30-35天；

所述增殖培養基的成分為：MS+1.1mg/L 6-BA+0.11mg/L NAA；

③生根培養：將經過步驟②繼代增殖培養后的構樹組培苗放于生根培養基上進行生根培養，培養條件為：光照強度2000-2500lx，光照時間10-12小時/d，溫度25-28℃，培養15-20天后即可出瓶煉苗；

所述生根培養基的成分為：1/3MS+0.1mg/L 6-BA+4.8g/L卡拉膠+1g/L瓊脂+30g/L蔗糖；

3)大棚煉苗：將經過組織培養的構樹苗由培養基中取出，用自來水將小苗根部的培養基洗凈，用稀釋1000倍的多菌靈或百菌清溶液浸泡10-20分鐘，然后種植到混有園土、河沙及少量珍珠巖的培養土苗盤里并噴淋定根水，園土、河沙、珍珠巖的比值是2:4:1，在植株上層套上塑料薄膜保水，保持濕度為75-90％，溫度23-26℃，培養20-30天后即可移栽大田；

(二)移栽大田階段

(1)播種：經大棚煉苗后，棄去黃化和發育不良的種苗，整理出健康種苗放入事先挖好的穴中，每穴放苗一株，放苗時使其根自然展開，覆土過根莖，同時保證枝干與主根的結合部分露出土外，覆土完成后將土壓實，并澆灌定根水；

(2)施肥管理：移栽大田2個月后進行初次施肥，初次施肥7-10天后對葉面噴施營養液進行追肥；所用肥料為農家肥與生態肥按照比例為1-3:2-5混合，施肥時間為每年4-8月份，每年施肥4-6次，施肥結合中耕除草進行；每1-2月用營養液進行葉面噴施一次；所述營養液是將20-30重量份的砂土、5-10重量份的草木灰與10-18重量份的蛭石混合后浸泡在60-80重量份的水中，浸泡2天后將其過濾，取液體加入10-15重量份的沼液混合攪拌均勻即可；

所述農家肥為家禽糞便；所述生態肥所述生態肥通過將20-40的重量份的尿素置于容器中，摻拌5-10的重量份烏龜殼、1-8重量份的白砂糖、5-10的重量份椰樹皮、7-12重量份的榕樹枯枝、7-12重量份的荷花桿、7-12重量份的山野豌豆藤、5-10重量份的野韭菜、7-12重量份的皂莢樹枯枝以及3-8重量份的纖維素酶，再澆入10-30重量份的水，然后進行堆漚，待原料全部腐爛變成腐爛質土后得到的。

2.根據權利要求1所述的一種雜交構樹組織培養快速繁殖方法，其特征在于，所述組織培養階段還包括外植體的采集步驟，具體為：選擇4-6月份的晴天或陰天進行采集，于上午的9-11點之前，采摘生長健壯、發育正常、無病蟲害、半木質化的雜交構樹嫩芽，去除雜質備用。

3.根據權利要求1所述的一種雜交構樹組織培養快速繁殖方法，其特征在于，所述移栽大田階段還包括整地的步驟，具體為：在種植前1-2個月經深翻耕后添加土壤調節劑將土壤pH值調節為5.7-6.6，將碎土耙平，施埋基底肥，按行距1.5-2.0m、株距1.5-2.2m挖穴，并在每個穴內施埋基底肥。