[發(fā)明專(zhuān)利]miR?647在制備治療胃癌的藥物中的用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710186450.8
• 申請(qǐng)日: 2017-03-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106974929A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李國(guó)新;葉耿泰;胡彥鋒;余江;朱顯軍;楊慶斌
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): A61K31/7105
• 分類(lèi)號(hào): A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州三環(huán)專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司44202
• 代理人: 劉孟斌

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種miR-647，具體涉及miR-647在制備治療胃癌的藥物中的用途。

背景技術(shù)

miRNA agomir是經(jīng)過(guò)特殊化學(xué)修飾的miRNA類(lèi)似物，通過(guò)模擬miRNA進(jìn)入miRISC復(fù)合物來(lái)調(diào)節(jié)靶mRNA的表達(dá)而發(fā)揮作用。與普通的miRNA mimics相比，agomir在動(dòng)物體內(nèi)具有更高的穩(wěn)定性和miRNA促進(jìn)效果，而且能克服體內(nèi)細(xì)胞膜、組織等障礙富集于靶細(xì)胞。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中可以用全身或局部注射、吸入、喂藥等方法進(jìn)行給藥，作用效果持續(xù)時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)6周。已有不少miRNA agomir相關(guān)研究成果發(fā)表。本研究用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的agomir-647購(gòu)自廣州市銳博生物科技有限公司(產(chǎn)品編號(hào)：miR40003317-1-10)。目前尚無(wú)該agomir-647的實(shí)驗(yàn)研究成果報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對(duì)胃癌臨床治療療效尚不理想而提供了一種治療胃癌的藥物組合物，本發(fā)明提供了miR-647在制備治療胃癌的藥物中的用途，本發(fā)明提供了agomir-647在制備治療胃癌的藥物中的用途。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，所采取的技術(shù)方案：一種治療胃癌的藥物組合物，所述藥物組合物包括miR-647類(lèi)似物agomir-647。所述agomir-647為體外合成的經(jīng)化學(xué)修飾的miR-647類(lèi)似物。

本發(fā)明提供了miR-647在制備治療胃癌的藥物中的用途。

本發(fā)明提供了agomir-647在制備治療胃癌的藥物中的用途。具體來(lái)講是提供了agomir-647在制備抑制胃癌轉(zhuǎn)移的藥物中的用途。

本發(fā)明通過(guò)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)在細(xì)胞和動(dòng)物水平首先證實(shí)miR-647對(duì)SRF mRNA的轉(zhuǎn)錄后抑制作用，并發(fā)現(xiàn)其可間接抑制轉(zhuǎn)移相關(guān)的重要骨架蛋白、SRF下游分子II型肌球蛋白A(MYH9)的表達(dá)。

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明通過(guò)胃癌組織qPCR和原位雜交等證實(shí)miR-647在胃癌中表達(dá)下調(diào)并與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)；通過(guò)生物信息學(xué)靶標(biāo)預(yù)測(cè)、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因篩選驗(yàn)證及胃癌細(xì)胞株miR-647功能驗(yàn)證等實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)miR-647/SRF/MYH9軸在胃癌轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵抑制作用。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中miR-647在胃癌中表達(dá)下調(diào)，并與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的圖片；

圖2為本發(fā)明實(shí)施例2中胃癌細(xì)胞系中的miR-647影響轉(zhuǎn)移相關(guān)基因SRF和MYH9表達(dá)的圖片；

圖3為本發(fā)明實(shí)施例3中miR-647/SRF/MYH9信號(hào)軸顯著抑制胃癌細(xì)胞遷移的圖片；

圖4為本發(fā)明實(shí)施例4中miR-647表達(dá)影響患者預(yù)后，并與SRF水平表達(dá)相關(guān)的圖片；

圖5為本發(fā)明實(shí)施例5中miR-647發(fā)揮抑癌作用是通過(guò)影響SRF表達(dá)實(shí)現(xiàn)的圖片。

具體實(shí)施方式

為更好的說(shuō)明本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)，下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。本發(fā)明miR-647類(lèi)似物指agomir-647。

實(shí)施例1：miR-647在胃癌中表達(dá)下調(diào)，并與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)

實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如下(結(jié)果如圖1所示)：

圖1中A：通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)109例人胃癌組織(T)以及相對(duì)應(yīng)的正常胃黏膜組織(N)中miR-647表達(dá)水平，其中使用U6RNA作為內(nèi)參。***p<.001

圖1中B：用餅圖及瀑布圖展示miR-647人胃癌組織以及相對(duì)應(yīng)的正常胃黏膜組織中mrR-647相對(duì)表達(dá)水平。miR-647相對(duì)水平的變化倍數(shù)(T/N)>2或<1/2則認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。瀑布圖：miR-647相對(duì)水平的變化倍數(shù)(log₂[T/N])>1或<-1則認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

如圖1所示，圖1中A和B通過(guò)不同統(tǒng)計(jì)方法說(shuō)明miR-647在胃癌中頻發(fā)表達(dá)下調(diào)。

圖1中C：miR-647表達(dá)水平與胃癌患者臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或局部浸潤(rùn)情況的相關(guān)關(guān)系分析。*P<.05；**P<.01。如圖圖1中C所示，miR-647表達(dá)與T、N、和TNM臨床分期相關(guān)。

圖1中D：qRT-PCR檢測(cè)5種胃癌細(xì)胞株中miR-647表達(dá)水平結(jié)果。如圖所示MGC 80-3表達(dá)最低，AGS和SNU-5表達(dá)最高。

圖1中E、F：qRT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染miR-647后的MGC 80-3與MKN45胃癌細(xì)胞中miR-647表達(dá)水平。***P<.001。如圖圖1中E、F所示，兩種細(xì)胞均有較好的轉(zhuǎn)染效率。