[發明專利]一種從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法

在審

• 申請號: 201710181521.5
• 申請日: 2017-03-23
• 公開（公告）號: CN106822196A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 高艷華;張麗;張釗;李庚;劉英
• 申請（專利權）人: 山東天智綠業生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/16
• 分類號: A61K36/16;C08B37/00
• 代理公司: 濟南日新專利代理事務所37224
• 代理人: 劉亞寧

1.一種從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)發酵：將乳酸菌與新鮮銀杏葉按質量比1:1000～10000的比例混勻，裝在密封袋中、缺氧條件、自然環境溫度下發酵20天以上；在進行提取前3～5天，加入銀杏葉質量的2％～6％的活性干酵母，繼續密封發酵；

(2)水提：取出發酵后的銀杏葉，按物料比1:5～12的比例加入水，70～95℃提取0.5～3h，過濾，得提取液和銀杏葉渣，提取液用于銀杏葉多糖的提取，銀杏葉渣用于銀杏葉黃酮的提?。?/p>

(3)上述提取液，用乙醇溶液提取1～3次，每次提取時間6～24h，提取后離心分離，得上清液和沉淀，沉淀即為銀杏葉多糖；

(4)調整上述上清液的乙醇濃度至50％～70％，與銀杏葉渣按重量比5～12:1的比例混合，60～85℃回流提取2～6h，過濾，濾液為銀杏葉黃酮粗提取物；

(5)銀杏葉黃酮粗提取物回收乙醇后，陶瓷膜過濾，透過液采用0.5～2BV/h流速通過大孔吸附樹脂lx-5，用55％～75％乙醇溶液洗脫，洗脫液以0.2～0.6BV/h流速直接通過大孔樹脂lxd-200或D301，收集流出液，濃縮，回收乙醇，噴霧干燥，得銀杏葉黃酮；

所述步驟(3)中，先將提取液濃縮至原體積的1/12～1/5，再加入1～5倍體積的95％乙醇溶液，室溫下提取6～24h。

2.根據權利要求1所述的從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法，其特征在于所述步驟(1)中，乳酸菌與新鮮銀杏葉的質量比為1:1000或1:5000。

3.根據權利要求1所述的從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法，其特征在于步驟如下：

乳酸菌與鮮銀杏葉按質量比1:1000混勻，裝在密封袋中，自然環境溫度發酵保藏90天；解開密封袋，加入銀杏葉質量的4％的活性干酵母，封口3天取出；按物料比1:8加入無離子水，70℃提取3h，過濾；提取液濃縮8倍，用4倍體積的95％的乙醇室溫下提取20h，離心分離，醇沉2次，沉淀烘干，得銀杏葉多糖；

上清液調整至乙醇濃度65％，與銀杏葉渣按10:1混合，75℃回流提取2.5h，過濾，得到銀杏葉黃酮粗提取物；回收乙醇，陶瓷膜過濾，透過液采用2BV/h流速通過大孔吸附樹脂lx-5，用60％乙醇洗脫，洗脫液以0.3BV/h流速直接通過大孔吸附樹脂lxd-200，收集流出液，濃縮，回收乙醇，噴霧干燥，得銀杏葉黃酮。

4.根據權利要求1所述的從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法，其特征在于步驟如下：

乳酸菌與鮮銀杏葉按質量比1:5000混勻，裝在密封袋中，自然環境溫度發酵保藏40天；解開密封袋，加入銀杏葉質量的2.5％的活性干酵母，封口5天取出；按物料比的1:5加入無離子水，80℃提取2h，過濾；提取液濃縮5倍，用2倍體積的95％的乙醇室溫下提取24h，離心分離，醇沉3次，沉淀烘干得到銀杏葉多糖；

上清液調整至乙醇濃度55％，與銀杏葉渣按5:1混合，80℃回流提取4h，過濾，得到銀杏葉黃酮粗提取物；回收乙醇，陶瓷膜過濾，透過液采用0.5BV/h流速通過大孔吸附樹脂lx-5，用70％乙醇洗脫，洗脫液以0.6BV/h流速直接通過大孔吸附樹脂lxd-200，收集流出液，濃縮，回收乙醇，噴霧干燥，得銀杏葉黃酮。

5.根據權利要求1所述的從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法，其特征在于步驟如下：

乳酸菌與鮮銀杏葉按質量比1:10000混勻，裝在密封袋中，自然環境溫度發酵保藏21天；解開密封袋，加入銀杏葉質量的5.4％的活性干酵母，封口3天取出；按物料比的1:12加入無離子水，90℃提取1.5h，過濾；提取液濃縮10倍，用5倍體積的95％的乙醇室溫下提取10h，離心分離，醇沉1次，沉淀烘干得到銀杏葉多糖；

上清液調整至乙醇濃度70％，與銀杏葉渣按12:1混合，60℃回流提取2h，過濾，得到銀杏葉黃酮粗提取物；回收乙醇，陶瓷膜過濾，透過液采用1BV/h流速通過大孔吸附樹脂lx-5，用75％乙醇洗脫，洗脫液以0.2BV/h流速直接通過大孔吸附樹脂D301，收集流出液，濃縮，回收乙醇，噴霧干燥，得銀杏葉黃酮。

6.根據權利要求1所述的從銀杏葉中同時提取銀杏葉多糖和銀杏葉黃酮的方法，其特征在于步驟如下：

乳酸菌與鮮銀杏葉按質量比1:6000混勻，裝在密封袋中，自然環境溫度發酵保藏52天；解開密封袋，加入銀杏葉質量的2％的活性干酵母，封口4天取出；按物料比的1:10加入無離子水，70℃提取3h，過濾；提取液濃縮9倍，用3倍體積的95％的乙醇室溫下提取6h，離心分離，醇沉3次，沉淀烘干得到銀杏葉多糖；

上清液調整至乙醇濃度50％，與銀杏葉渣按8:1混合，70℃回流提取3h，過濾，得到銀杏葉黃酮粗提取物；回收乙醇，陶瓷膜過濾，透過液采用1.2BV/h流速通過大孔吸附樹脂lx-5，用68％乙醇洗脫，洗脫液以0.6BV/h流速直接通過大孔吸附樹脂D301，收集流出液，濃縮，回收乙醇，噴霧干燥，得銀杏葉黃酮。