[發明專利]一種微生物多功能肥的制備方法與發酵培養基組成

有效

• 申請號: 201710179484.4
• 申請日: 2017-03-23
• 公開（公告）號: CN106883998B
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發明（設計）人: 李瑞芳
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05G3/00;C05G5/20;C05G3/60;C05G3/80;C05F17/20;C12R1/125
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 李冉

1.一種微生物多功能肥的制備方法，其特征為：包括如下操作步驟：

(1)培養基配制：分別配制菌種活化培養基、種子培養基和發酵培養基，高溫滅菌后備用；

所述菌種活化培養基為：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，加水至1L，pH7.0-7.5；

所述種子培養基為：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，加水至1L，pH7.0-7.5；

所述發酵培養基為：葡萄糖15000g，蛋白胨10000g，酵母膏5000g，KH₂PO₄1300g，K₂HPO₄1000g，MgSO₄·7H₂O500g，MnSO₄·H₂O100g，FeSO₄·7H₂O100g，CaC1₂·2H₂O1500g，加水至1000L，pH7.0-7.5；

(2)菌種活化：挑取斜面保藏的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BS501a接種于步驟(1)制得的菌種活化培養基中，于35-37℃，180-220r/min搖床振蕩培養16-24h，得活化枯草芽孢桿菌菌液；

(3)液體種子制備：按體積百分數為5％-10％的接種量將步驟(2)活化的枯草芽孢桿菌菌液接種于步驟(1)制得的種子培養基中，于35-37℃，通空氣培養16-24h，得到液體種子；

(4)液態發酵：按體積百分數為5％-10％的接種量將步驟(3)制得的液體種子接種于步驟(1)制得的發酵培養基中，于30℃，通無菌空氣培養48h，經平板細菌計數，活菌數達3×10⁹-9×10⁹CFU/mL，即得活菌體培養物；

(5)葉面肥和拌種肥制備：向步驟(4)制得的活菌體培養物靜置，菌體沉淀，除去菌體，即得微生物葉面肥和拌種肥；

(6)地面肥的制備：將步驟(4)獲得的活菌體培養物通風干燥，即獲得地面肥。