[發(fā)明專利]一種刺榆組培苗繼代培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710177053.4
• 申請日: 2017-03-23
• 公開（公告）號: CN107087541B
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張玉杰
• 申請（專利權(quán)）人: 上海杉一植物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海精晟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31253
• 代理人: 丁清鵬

本發(fā)明公開了一種刺榆組培苗繼代培養(yǎng)方法，它按照以下步驟順序進行：(1)刺榆外植體處理：將外植體枝條修剪、清洗，放到清水中催芽；(2)無菌苗的獲得：將外植體枝條上萌發(fā)的腋芽通過消毒處理，接種到啟動培養(yǎng)基中，獲得無菌苗；(3)無菌苗的繼代：將無菌苗轉(zhuǎn)到繼代培養(yǎng)基中進行繼代培養(yǎng)，多次進行。本發(fā)明首次提供了刺榆組培快繁方法，通過添加椰子汁調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，解決了刺榆組培苗多次繼代后的黃化現(xiàn)象；顯著提高繼代培養(yǎng)的增殖系數(shù)；增加繼代培養(yǎng)的繼代次數(shù)，如果采用5代擴繁，1代生根交替進行的方法，理論上刺榆繼代可以無限進行。降低了生產(chǎn)成本，為刺榆的規(guī)模化、工廠化生產(chǎn)提供可能。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物培植領(lǐng)域，涉及一種植物組織培養(yǎng)的方法，具體涉及一種刺榆組培苗繼代培養(yǎng)方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

刺榆為榆科刺榆屬落葉小喬木，高可達10～15米，或呈灌木狀；喜光，耐寒，耐干旱瘠薄，各種土質(zhì)易于生長，可作固沙樹種。適應(yīng)性強，萌蘗能力強，生長速度較慢。木材淡褐色，堅硬而細致，可供制農(nóng)具及器具用；樹皮纖維可作人造棉、繩索、麻袋的原料；嫩葉可作飲料；因樹枝有棘刺，生長頗速，常成灌木狀，故也是作綠籬用的樹種。種子可榨油。

刺榆繁殖以種子繁殖為主，也可扦插和分株繁育。但是種子繁殖易發(fā)生性狀變異，不利于保留母本優(yōu)良性狀；傳統(tǒng)的無性繁殖方法又因繁殖系數(shù)低，成苗緩慢，不能提供大量苗木，限制了刺榆的推廣。組織培養(yǎng)技術(shù)，選用優(yōu)良單株作為外植體，保證了遺傳性狀的穩(wěn)定，縮短其良種推廣的周期,提升種苗質(zhì)量,為市場上快速、大量提供刺榆優(yōu)良苗木提供可能。

中國發(fā)明專利申請CN105660292A公開了“一種刺榆之嫁接方法”；專利申請CN101940604A公開了“刺榆不同提取物的降血脂和抗氧化活性及在醫(yī)藥中的應(yīng)用”；專利申請CN105724158A公開了“一種刺榆苗之種植方法”。

綜上所述，可見關(guān)于刺榆的研究較少，僅在提取物、種植方法和嫁接方法幾個方面有少量研究，關(guān)于刺榆組培方面的研究幾乎沒有看到報道。因此，建立一種刺榆組培快繁方法，是目前對于刺榆研究急需解決的技術(shù)難題。本發(fā)明通過多次試驗，摸索出了一種刺榆的繼代培養(yǎng)方法，為市場上提供大量優(yōu)質(zhì)的刺榆苗木提供可能，也為刺榆組培的進一步研究提供理論借鑒。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，提供一種刺榆組培苗繼代培養(yǎng)方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述缺點和不足。

本發(fā)明解決刺榆組培方面研究的空白，該培養(yǎng)方法所得組培苗，增殖系數(shù)高且穩(wěn)定，可多次繼代，周期短，操作過程簡單，能有效降低人工成本，利于大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)。

本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問題，可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

一種刺榆組培苗繼代培養(yǎng)方法，其特征在于：包括刺榆外植體處理、無菌苗的獲得和無菌苗的繼代，具體操作步驟如下:

(1)外植體處理：將采集來的外植體進行預(yù)處理，去掉枯葉、爛葉，剪掉破損、壞死的枝條，放到1‰的洗衣粉溶液中浸泡10min，在流水下用細軟的毛刷刷掉枝條表面灰塵，放到清水中進行催芽培養(yǎng)，每天更換一次清水，5d左右，枝條開始萌動，抽出新枝；

(2)無菌苗的獲得：當(dāng)新枝長度大于3cm時，距離新枝基部葉片0.2cm處將其剪下，距葉柄基部2-3mm處將葉柄、葉片剪掉，放到1％洗衣粉中浸泡5min，流水沖洗30-60min，然后在超凈工作臺上用75％酒精消毒20-30s，無菌水沖洗1-2次，再用0.02-0.1％升汞消毒6-16min，無菌水沖洗5-6次，濾紙吸干水分后，切成帶一個或二個腋芽的莖尖或莖段接種到啟動培養(yǎng)基中，每瓶接種2株，7-12d后腋芽開始萌動，形成小芽，將大于2cm的芽轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)；所述啟動培養(yǎng)基成分為：DKW+6-BA0.05-2.0mg/L+椰汁10-200mL/L+白砂糖30g/L+瓊脂5.8-6.0g/L，pH:5.9-6.0；