[發(fā)明專利]一種基于高營養(yǎng)性培養(yǎng)基制備高活性果蠅蛋白質(zhì)的方法

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• 申請日: 2017-03-22
• 公開（公告）號: CN107047481A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 單峰
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東人為峰健康管理有限公司
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033;A23K10/20;A23K10/14;A23K20/142;A23K20/163
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1.一種基于高營養(yǎng)性培養(yǎng)基制備高活性果蠅蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)取40-60份大豆粉、40-60份的玉米粉和5-10份瓊脂加入100-150份去離子水，加熱攪拌一段時間獲得糊狀混合料；

(2)按重量份取步驟(1)的糊狀混合料40-60份，蜂王漿20-30份，紅棗泥50-80份，香蕉泥50-80份以及20-40份去離子水放入球磨機中研磨20-40min，將所得的研磨物放入燒杯中，隨后把燒杯置于紫外燈下殺菌消毒，然后向燒杯中加入10-20份的酵母粉，混合均勻后，得高營養(yǎng)性培養(yǎng)基；

(3)將上述所得的高營養(yǎng)性培養(yǎng)基均勻鋪撒在玻璃板上，鋪撒厚度為4-6cm，取鋪撒的高營養(yǎng)性培養(yǎng)基6-9wt％的果蠅卵，均勻接種于鋪撒后的培養(yǎng)物表面，再使用培養(yǎng)物對果蠅卵進行覆蓋，覆蓋厚度為2-3cm；

(4)將上述玻璃板在適宜的培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)至幼蟲出現(xiàn)后繼續(xù)培養(yǎng)3-5天后收集幼蟲；

(5)將步驟(4)的幼蟲收集后采取蛋白酶水解法提取果蠅幼蟲蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于高營養(yǎng)性培養(yǎng)基制備高活性果蠅蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，所述步驟(1)的加熱溫度為70-90℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于高營養(yǎng)性培養(yǎng)基制備高活性果蠅蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，所述步驟(4)適宜的培養(yǎng)環(huán)境是溫度24-28℃，相對濕度約為60％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于高營養(yǎng)性培養(yǎng)基制備高活性果蠅蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，所述步驟(5)蛋白酶水解法提取果蠅蛋白質(zhì)的具體步驟包括：

(1)將果蠅幼蟲經(jīng)過消毒和洗滌，然后將干凈果蠅幼蟲加入一定體積水中進行膠磨破碎得到果蠅幼蟲漿料，其中干凈果蠅幼蟲與水的質(zhì)量體積比(g/mL)為1：20-25；

(2)將步驟(1)的漿料升溫至50-60℃，并加入2790堿性蛋白酶進行水解一定的時間，待到漿料pH降到8.5左右時加入胰蛋白酶進行水解一段時間，之后待到漿料pH降至7.5左右時加入AS1398中性蛋白酶繼續(xù)進行水解一段時間，其中，所述蛋白酶的添加量均為步驟(1)漿料的1-2wt％，且蛋白酶的酶活為3-5萬單位/g；

(3)將步驟(2)水解完畢后的漿料進行滅酶處理，然后進行初濾處理，得濾液，初濾后的濾液繼續(xù)送入超濾膜進行精濾處理，精濾處理后的濾液備用；所述超濾膜精濾處理中濾膜的孔徑約為50nm，跨膜壓差為0.1MPa，膜面流速為4-5m/s；

(4)將步驟(3)精濾得到的濾液加入一定量的氨基酸和葡萄糖，在100-120℃的溫度下反應(yīng)約60min的時間以進行濾液的脫腥增香處理；所述氨基酸和葡萄糖的加入量分別為濾液質(zhì)量的0.3-0.6％以及0.4-0.6％；

(5)最后將步驟(4)的反應(yīng)液進行濃縮后進行噴霧干燥即得所述果蠅蛋白質(zhì)。