[發(fā)明專利]熒光定量RT?PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的引物對(duì)、探針、試劑盒及方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710173168.6 | 申請(qǐng)日： | 2017-03-22 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN106868214A | 公開（公告）日： | 2017-06-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 魏曉鋒;蔡驍垚;熊煒;胡建華;張泉;其他發(fā)明人請(qǐng)求不公開姓名 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/70 | 分類號(hào)： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海序倫律師事務(wù)所31276 | 代理人： | 周東萍 |
| 地址： | 200241 *** | 國(guó)省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 熒光 定量 rt pcr 檢測(cè) 輪狀病毒 引物 探針 試劑盒 方法 | ||
1.一種熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的引物對(duì)，其特征在于，所述引物對(duì)具有如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的堿基序列。
2.一種熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的探針，其特征在于，所述探針具有如SEQ ID No:3所示的堿基序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的探針，其特征在于，所述探針的5’結(jié)合有FAM，所述探針的3’結(jié)合有BHQ1。
4.一種熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權(quán)利要求1所述的引物對(duì)、以及權(quán)利要求2或3所述的探針。
5.一種熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的方法，其特征在于，包括以下步驟：以鼠的腦組織的cDNA為模板，SEQ ID No:1和SEQ ID No:2為引物，SEQ ID No:3為探針，進(jìn)行熒光定量RT-PCR擴(kuò)增，采集熒光信號(hào)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的方法，其特征在于，所述熒光定量RT-PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系為：Premix Ex Taq 10μL、ROX Reference Dye II 0.2μL、cDNA模板2μL、SEQ ID No:1引物0.4μL、SEQ ID No:2引物0.4μL、SEQ ID No:3探針0.8μL、加滅菌蒸餾水至20μL。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的熒光定量RT-PCR檢測(cè)鼠輪狀病毒的方法，其特征在于，所述熒光定量RT-PCR擴(kuò)增的反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30sec；95℃變性5sec，60℃退火延伸34sec，40個(gè)循環(huán)。
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