[發明專利]一種促進出根的甘草組織培養方法

在審

• 申請號: 201710171872.8
• 申請日: 2017-03-22
• 公開（公告）號: CN106797891A
• 公開（公告）日: 2017-06-06
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 陳志育
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司11212
• 代理人: 談杰

技術領域

本發明屬于甘草組織培養技術領域，尤其涉及一種促進出根的甘草組織培養方法。

背景技術

甘草，（學名：Glycyrrhiza uralensis Fisch）別名：國老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子。豆科、甘草屬多年生草本，根與根狀莖粗壯，是一種補益中草藥。對人體很好的一種藥，藥用部位是根及根莖，藥材性狀根呈圓柱形，長25～100厘米，直徑0.6～3.5厘米。外皮松緊不一，表面紅棕色或灰棕色。根莖呈圓柱形，表面有芽痕，斷面中部有髓。氣微，味甜而特殊。功能主治清熱解毒、祛痰止咳、脘腹等。喜陰暗潮濕，日照長氣溫低的干燥氣候。甘草多生長在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠邊緣和黃土丘陵地帶。根和根狀莖供藥用。傳統的甘草獲取方法是采挖葉生植物資源，造成水土流失和嚴重土壤沙漠化。另外，甘草種子主要來自野生甘草，其品種混雜，種子稀缺，發芽率極低，野生資源不適應規?；蜆藴驶a的需要。同時由于人們破壞性地對葉生甘草采挖，使野生植物幾乎滅絕，對甘草的保護性利用迫在眉睫，但由于甘草種植發芽率不高和人們對其此生代謝物的需求，從而使甘草的組織培養對研究和生產具有重要作用，目前的甘草培養基的生根效率不高，不能滿足需求。

稀土元素是17種特殊的元素的統稱，它的得名是因為瑞典科學家在提取稀土元素時應用了稀土化合物，所以得名稀土元素。然而稀土是歷史遺留下來的名稱，稀土是從18世紀末開始陸續發現，當時人們常把不溶于水的固體氧化物稱為土，例如，將氧化鋁稱為“陶土”，氧化鈣稱為”堿土“等。稀土一般是以氧化物狀態分離出來的，當時比較稀少，因而得名為稀土（Rare Earth，簡稱RE或R），然而經過大量的科學研究，在組織培養當中添加了稀土元素會大大地提高組織培養的質量。

鑭是一種金屬元素，原子序數57，原子量138.9055，元素名來源于希臘文，原意是“隱蔽”。銀灰色光澤，質地較軟，密度6.174g/cm3，熔點921℃，沸點3457℃；化學性質活潑，暴露于空氣中很快失去金屬光澤生成一層藍色的氧化膜，但是它并不能保護金屬，繼而進一步氧化生成白色的氧化物粉末。能和冷水緩慢作用，易溶于酸，可以多種非金屬反應。金屬鑭一般保存于礦物油或稀有氣體中。鑭在地殼中的含量為0.00183%，在稀土元素中含量僅次于鈰。

發明內容

基于現有技術存在上述問題，本發明提供一種促進出根的甘草組織培養方法，其以1/2MS培養基為基礎培養基，調整了培養基中激素配方和添加了稀土元素，并在增值培養當中添加增強顏色光源，極大地提高了甘草增殖苗的出根率，本發明具有出根率高的優點。

一種促進出根的甘草組織培養方法，其包括以下步驟：

步驟S10，按以下配方配制培養基：以1/2MS培養基為基礎培養基，添加阿司匹林溶液的體積分數是為0.03%、NAA（萘乙酸）的濃度為0.05mg/L、ZT(玉米素)的濃度為2.0 mg/L、硝酸鑭的濃度為3g/L，維生素B₁₂的濃度為0.3mg/L，瓊脂粉的濃度為10g/L、白砂糖的濃度為7g/L；

步驟S20，選擇生長正常和健康的甘草增殖組培苗芽，在超凈工作臺中將甘草增殖組培苗芽非正常部分切除，將甘草增殖組培苗芽用手術刀分開成單株，并接種到裝有步驟S10配制好的培養基的組培瓶中，并轉移到組培室中；

步驟S30，將組培室中的環境溫度調整為27℃～31℃，使用2000lux光照強度的自然光、藍光增強光源和紅光增強光源照射甘草增殖組培苗芽，光照時間為光照16小時/黑暗8小時。

優選地，所述的步驟S10中還包括步驟S11，對培養基進行121℃的高溫蒸汽滅菌20分鐘。

優選地，所述的步驟S30中的增強光源是LED燈，紅色增強光源是紅色LED燈，藍色增強光源藍色LED燈。

優選地，所述的步驟S50中的紅色光源是波段為650nm-700nm的紅光，藍色光源是波段為450nm-470nm的藍光。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步的描述。

一種促進出根的甘草組織培養方法，其包括以下步驟：

步驟S10，按以下配方配制培養基：以1/2MS培養基為基礎培養基，添加阿司匹林溶液的體積分數是為0.03%、NAA（萘乙酸）的濃度為0.05mg/L、ZT(玉米素)的濃度為2.0 mg/L、硝酸鑭的濃度為3g/L，維生素B₁₂的濃度為0.3mg/L，瓊脂粉的濃度為10g/L、白砂糖的濃度為7g/L；