[發(fā)明專利]一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710171865.8
• 申請(qǐng)日: 2017-03-22
• 公開（公告）號(hào): CN106912381A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 不公告發(fā)明人
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陳志育
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11212
• 代理人: 談杰

1.一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法，其特征在于，其包括以下步驟：

步驟S10確定初步篩選范圍，檢索查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，對(duì)比其他植物物種組培過程中添加稀土元素和酪蛋白的量并確定稀土元素和酪蛋白的初步篩選范圍；

步驟S20選擇外植體，選擇健康、生長(zhǎng)環(huán)境一致并且生長(zhǎng)狀態(tài)相似的甘草的種子作為外植體，對(duì)外植體進(jìn)行統(tǒng)一的消毒滅菌處理；

步驟S30對(duì)照培養(yǎng)，使用單一變量法配制不同濃度稀土元素和酪蛋白添加量的培養(yǎng)基，分別接種相同量的甘草種子，并進(jìn)行常規(guī)組織培養(yǎng)；

步驟S40記錄檢測(cè)參數(shù)，培養(yǎng)7天后統(tǒng)計(jì)每個(gè)稀土元素濃度和酪蛋白濃度梯度中萌發(fā)的數(shù)量和褐化的數(shù)量，并計(jì)算萌發(fā)率和褐化率；

步驟S50生長(zhǎng)量計(jì)算，分別將相同濃度梯度的每個(gè)平行實(shí)驗(yàn)組中的幼苗取出，用清水沖洗干凈，擦干表面水分并對(duì)幼苗進(jìn)行稱重，記錄重量；

步驟S60計(jì)算評(píng)估因數(shù)，將重量數(shù)值縮小10倍，再加上萌發(fā)率減去褐化率計(jì)算出評(píng)估因數(shù)，對(duì)比不同濃度梯度的評(píng)估因數(shù)，挑選出數(shù)值最大的評(píng)估因數(shù)對(duì)應(yīng)的稀土元素和酪蛋白的濃度梯度；

步驟S70縮小篩選范圍，使用步驟S60中挑選出的濃度梯度范圍重復(fù)進(jìn)行步驟S10-S60縮小篩選范圍或者確定最適濃度；

步驟S80反向篩選基礎(chǔ)培養(yǎng)基，使用步驟S70確定的最適濃度搭配不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基，重復(fù)步驟S40和步驟S50，并使用步驟S60的計(jì)算方法計(jì)算評(píng)估因數(shù)，確定最適基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法，其特征在于，所述的步驟S30中配制不同濃度是設(shè)置5-15個(gè)濃度梯度。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法，其特征在于，所述的步驟S30中接種的甘草花藥的培養(yǎng)基的數(shù)量為每個(gè)濃度梯度的培養(yǎng)基設(shè)置10-20組平行實(shí)驗(yàn)組。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法，其特征在于，所述的稀土元素是鈰元素。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法，其特征在于，所述的步驟S70中重復(fù)的次數(shù)是2-3次。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高萌發(fā)率甘草無菌播種培養(yǎng)基篩選方法，其特征在于，所述的步驟S80中不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基、N6培養(yǎng)基、B5培養(yǎng)基、Nitsh培養(yǎng)基、White培養(yǎng)基和Miller培養(yǎng)基。