[發(fā)明專利]一種復合抑藻劑的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710171643.6
• 申請日: 2017-03-21
• 公開（公告）號: CN107006527B
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發(fā)明（設計）人: 張庭廷;楊曉輝;彭桂瑩
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽師范大學
• 主分類號: A01N65/08
• 分類號: A01N65/08;A01N63/00;A01P13/00;C12N1/20;C12N1/02;C12R1/01
• 代理公司: 北京元本知識產(chǎn)權(quán)代理事務所 11308
• 代理人: 范奇

本發(fā)明公開了一種復合抑藻劑的制備方法，所述的方法包括以下步驟：消毒工序、培養(yǎng)工序，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下特點：按本發(fā)明方法所制的微生物和金魚藻的復合抑藻劑，共同抑藻的最高效率達到了100％，超過了單獨的金魚藻(61.25％)和單獨的微生物(70.11％)；且達到最高抑制率的時間由單獨的金魚藻的第4天和單獨的微生物的第4d提前到了共同作用時的第2d；可以得出微生物與金魚藻共同作用于銅綠微囊藻，起到協(xié)同抑制的作用，縮短了起效時間。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于抑藻劑的制備方法，特別屬于復合抑藻劑的制備方法這一技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

水華(water bloom)通常是指當水體達到富營養(yǎng)化或嚴重富營養(yǎng)化的狀態(tài)時，在一定的溫度、光照等條件下在水面形成或薄或厚的綠色或其他顏色的藻類漂浮物的現(xiàn)象。由于藻類具有浮力和運動能力，絕大部分的水華通常都是由浮游藻類引起的，引起水華現(xiàn)象的浮游藻的種類比較多，如藍藻、綠藻、裸藻、硅藻等，其中，藍藻水華是最為常見也是最為嚴重的。這是由于藍藻獨特的生理生態(tài)特性，偽空泡或偽空泡群結(jié)構(gòu)、膠質(zhì)鞘結(jié)構(gòu)、耐營養(yǎng)鹽脅迫性、CO₂濃縮機制、他感效應，使得它在生態(tài)系統(tǒng)的生存競爭中，占據(jù)有利的優(yōu)勢，成為水華藻類中的優(yōu)勢藻種。藍藻水華具有重大危害，而水體的富營養(yǎng)化是發(fā)生水華現(xiàn)象的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。因此，防治水華最重要的措施是控制水體的富營養(yǎng)化，即切斷污染源。然而，導致水質(zhì)富營養(yǎng)化的營養(yǎng)鹽來源很復雜，使得其控制難度較大，治理水華的另一個重要措施是直接去除有害藻類。該種治理方法主要可以分為物理法、化學法和生物法。利用水生植物的化感作用來抑藻也是生物法之一，化感作用是指一種生物產(chǎn)生一種或多種生物化學成分，以影響其他生物生長、生存與繁殖的生物學現(xiàn)象，水生植物向水體中釋放的化感物質(zhì)，大多數(shù)是植物的次生代謝產(chǎn)物，自然條件下即可降解，不會長期積累，因此生態(tài)安全性良好。但通常的水生植物的化感物質(zhì)具有都有使用量大、起效慢的缺點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種復合抑藻劑的制備方法，所制的復合抑藻劑具有起效快的特點。

本發(fā)明解決技術(shù)問題的技術(shù)方案為：一種復合抑藻劑的制備方法，包括以下步驟：

a)消毒工序：將金魚藻(Ceratophyllum demersum L.)于室溫中浸入重量濃度為3％的次氯酸鈉(NaClO)溶液中，靜置3-5分鐘，進行消毒，再用無菌水清洗沖洗5-6次，金魚藻與次氯酸鈉溶液的重量比為1:8-12；

b)培養(yǎng)工序：將上述消毒好的金魚藻放入盛有Hoagland(0.1×)培養(yǎng)液的1000mL錐形瓶中，再按10⁵個/mL細菌密度加入微生物菌種，用消毒牛皮紙封口，于25℃、光照強度4000lx的環(huán)境中培養(yǎng)0.5-1.0個月，用定性濾紙過濾，取濾液進行抑藻，金魚藻與Hoagland(0.1×)培養(yǎng)液的重量體積比為1：90-120。

所述的微生物菌種通過以下方法制備：

取金魚藻植株周圍(0.1m*0.1m)水樣，用定性濾紙過濾，以消除原生動物并去除水中雜質(zhì)，取0.3ml涂于含有牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的平板，37℃條件下培養(yǎng)48h，用平板劃線法進行反復分離純化，將純化的單克隆菌種分別接入盛有500mL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基或500mL PDA液體培養(yǎng)基的1000mL錐形瓶中，置于150r/min,30℃條件下振蕩培養(yǎng)3d，將培養(yǎng)好的菌液4000r·min^-1離心15min，得到沉淀物，將沉淀物加入到BG-11培養(yǎng)基搖勻，馴化培養(yǎng)48h進行抑藻實驗，抑藻時細菌在藻液中的個數(shù)為10⁵～10⁶個/mL，選取10⁵個/mL時，第4天的抑藻效率大于40％的菌種。

所述的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 5g，水定容至1000mL，pH 7.2-7.4。