[發(fā)明專利]一種乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測引物及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710168670.8
• 申請日: 2017-03-21
• 公開（公告）號: CN107058523A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 任緒義;虞閏六;施宏
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州迪安醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司;杭州迪安醫(yī)學(xué)檢驗中心有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32204
• 代理人: 丁靜靜,肖明芳

1.一種乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測引物，其特征在于，包括SEQ ID NO.：1～42所示的核苷酸序列。

2.一種乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒中包括SEQ ID NO.：1～42所示的引物。

3.權(quán)利要求1所述的乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測引物在乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估中的應(yīng)用。

4.一種乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)石蠟組織RNA提取；

(2)逆轉(zhuǎn)錄；

(3)熒光定量PCR擴增；

(4)結(jié)果分析：判斷復(fù)發(fā)預(yù)測風(fēng)險具體按照如下標(biāo)準(zhǔn)：低風(fēng)險：RS≤18；中風(fēng)險：18＜RS＜31；高風(fēng)險：RS≥31。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測方法，其特征在于，步驟(2)中，逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系為20μL，其中，模板RNA 11μL，RT酶1μL，RI酶1μL，dNTP 2μL，5×buffer 4μL，隨機引物1μL；

逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件：42℃30min，95℃5min。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測方法，其特征在于，步驟(3)中，熒光定量PCR擴增體系為：PCR反應(yīng)體系為20μL，其中2×Mix 10μL，上游與下游混合引物(10μmol/L)0.4μL，模板RNA2μL，焦碳酸二乙酯(DEPC)處理水7.6μL。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險評估21基因檢測方法，其特征在于，步驟(3)中，熒光定量PCR反應(yīng)條件為：94℃20s，60℃15s，延伸72度15s，熒光采集點在60℃，反應(yīng)體積設(shè)置為20μL。