[發明專利]一種焦磷酸測序聯合測序法檢測酒精代謝基因的引物及其應用有效
| 申請號： | 201710163648.4 | 申請日： | 2017-03-20 |
| 公開（公告）號： | CN106987623B | 公開（公告）日： | 2021-01-26 |
| 發明（設計）人： | 任緒義;張鋒;曹子豪 | 申請（專利權）人： | 杭州迪安醫學檢驗中心有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 310030 浙江省杭*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 磷酸 聯合 測序法 檢測 酒精 代謝 基因 引物 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種非診斷目的的焦磷酸測序聯合測序法檢測酒精代謝基因的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：
(1)提取DNA模板；
(2)多重PCR：將SEQIDNO.：1~4所示的4條引物混合，進行多重PCR；
(3)單鏈純化：使用鏈霉親和素包被的磁珠對PCR擴增產物進行單鏈純化；
(4)焦磷酸測序：將SEQIDNO.：5~6所示的2條引物混合，進行多重焦磷酸測序；
步驟(4)中，設置測序序列：C/TGC/TAGGACAG；
步驟(4)中，設置堿基加樣順序：ACTGCTAGA；
步驟(2)中，多重PCR擴增反應條件如下：95℃預變性2min，95℃變性25s，60℃退火30s，72℃延伸30s，進行35個循環，最后72℃延伸5min；
步驟(2)中，SEQIDNO.：1~4所示引物濃度的比例是1：1；
步驟(4)中，SEQIDNO.：5~6所示引物的濃度是1：1。
2.根據權利要求1所述的非診斷目的的焦磷酸測序聯合測序法檢測酒精代謝基因的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的DNA模板為口腔黏膜細胞DNA或EDTA抗凝全血的DNA。
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