[發(fā)明專利]DNA包被液及其制備方法和DNA包被方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710161745.X | 申請日： | 2017-03-17 |
| 公開（公告）號： | CN106932595B | 公開（公告）日： | 2019-04-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張鷺鷺;李先坤;張愛國 | 申請（專利權(quán)）人： | 鄭州科蒂亞生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/544;G01N33/531 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227 | 代理人： | 趙青朵 |
| 地址： | 450001 河南省鄭州市高*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | dna 包被 及其 制備 方法 | ||
1.一種DNA雜交方法，其特征在于，包括如下步驟：將引物5’-CACTTCACTTTCTTTCCAAGAG-3’與DNA包被液混合均勻，所述DNA包被液由硫酸銨、氯化鈉和水組成；以質(zhì)量百分比計，各組分用量為：硫酸銨42.0％～43.0％，氯化鈉0.5％～0.8％，水補足；所述DNA包被液的pH值為6.0～6.2，混合液以每孔100μL加入到微孔板中，室溫放置20h，棄掉孔內(nèi)液體，干燥微孔板，然后進行雜交試驗，首先加入預(yù)放大分子，55℃孵育40分鐘；再加入放大分子，55℃孵育40分鐘；然后加入探針標記物，50℃孵育40分鐘，最后加入底物，46℃孵育20min，用冷光儀測定其化學發(fā)光信號的光子數(shù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA雜交方法，其特征在于，所述干燥為在10％濕度條件下干燥3h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA雜交方法，其特征在于，所述用于定量檢測的DNA包被液制備方法為將硫酸銨、氯化鈉溶解于水中，調(diào)節(jié)pH值至6.0～6.2，過濾除菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的DNA雜交方法，其特征在于，調(diào)節(jié)pH值采用的試劑為硫酸或氨水。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA雜交方法，其特征在于，所采用的DNA的包被方法采用DNA包被液作為緩沖液，將DNA樣品與固相載體進行孵育。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的DNA雜交方法，其特征在于，所述固相載體為聚苯乙烯固相載體。
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