[發明專利]靶向mesothelin的第四代嵌合抗原受體的制備方法和用途

有效

• 申請號: 201710160415.9
• 申請日: 2017-03-17
• 公開（公告）號: CN108624608B
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 黃飛;金濤;王海鷹;何鳳;史子嘯
• 申請（專利權）人: 上海恒潤達生生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C07K19/00;C12N15/867;C12N5/10;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶啟長;韋東

1.一種多核苷酸序列，所述多核苷酸序列選自：

(1)含有依次連接的抗間皮素單鏈抗體的編碼序列、人CD8α鉸鏈區的編碼序列、人CD8跨膜區的編碼序列、人CD28胞內區的編碼序列、人41BB胞內區的編碼序列、人CD3ζ胞內區的編碼序列、任選含有EGFR的含胞外結構域III和胞外結構域IV的片段的編碼序列、和任選含有人IL-15片段的編碼序列的多核苷酸序列；和

(2)(1)所述多核苷酸序列的互補序列，

所述抗間皮素單鏈抗體的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第23-128位氨基酸序列所示；所述抗間皮素單鏈抗體的重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第141-259位氨基酸序列所示；所述人CD8α鉸鏈區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第260-306位氨基酸序列所示；所述人CD8跨膜區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第307-328位氨基酸序列所示；所述人CD28胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第329-369位氨基酸序列所示；所述人41BB胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第370-417位氨基酸序列所示；所述人CD3ζ胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第418-528位氨基酸序列所示；所述EGFR的片段的氨基酸序列如SEQ IDNO:2第577-911位氨基酸序列所示；所述人IL-15的片段的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第985-1098位氨基酸序列所示，

所述多核苷酸序列還含有2A肽和人IL-15信號肽的編碼序列，所述2A肽和人IL-15信號肽設置于所述IL-15片段的N端。

2.如權利要求1所述的多核苷酸序列，其特征在于，

所述抗間皮素單鏈抗體的輕鏈可變區的編碼序列如SEQ ID NO:1第67-384位多核苷酸所示；所述抗間皮素單鏈抗體的重鏈可變區的編碼序列如SEQ ID NO:1第421-777位多核苷酸所示；所述人CD8α鉸鏈區的編碼序列如SEQ ID NO:1第778-918位多核苷酸所示；所述人CD8跨膜區的編碼序列如SEQ ID NO:1第919-984位多核苷酸所示；所述人CD28胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第985-1107位多核苷酸所示；所述人41BB胞內區的編碼序列如SEQID NO:1第1108-1251位多核苷酸所示；所述人CD3ζ胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第1252-1584位多核苷酸所示；所述EGFR的片段的編碼序列如SEQ ID NO:1第1743-2733位多核苷酸所示；

所述人IL-15胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第2953-3294位多核苷酸所示。

3.如權利要求1或2所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列在所述抗間皮素單鏈抗體的編碼序列前還含有信號肽的編碼序列。

4.如權利要求3所述的多核苷酸序列，其特征在于，在所述抗間皮素單鏈抗體的編碼序列前的所述信號肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-22位氨基酸序列所示。

5.如權利要求4所述的多核苷酸序列，其特征在于，在所述抗間皮素單鏈抗體的編碼序列前的所述信號肽的編碼序列如SEQ ID NO:1第1-66位多核苷酸所示。

6.如權利要求1或2所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列還含有2A肽和GM-CSF受體α鏈信號肽的編碼序列，所述2A肽和GM-CSF受體α鏈信號肽設置于所述EGFR片段的N端。

7.如權利要求6所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述GM-CSF受體α鏈信號肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第555-576位氨基酸所示。

8.如權利要求6或7所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述GM-CSF受體α鏈信號肽的多核苷酸序列如SEQ ID NO:1第1663-1742位多核苷酸所示。