[發(fā)明專利]一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710158638.1
• 申請(qǐng)日: 2017-03-17
• 公開（公告）號(hào): CN107597216A
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李芳芳;曾驥孟;胡鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 李芳芳
• 主分類號(hào): B01L3/00
• 分類號(hào): B01L3/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32204
• 代理人: 柏尚春

1.一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)、樣本預(yù)處理：無菌條件下收集細(xì)胞培養(yǎng)上清或人體體液樣本，用PBS調(diào)整樣本的濃度，經(jīng)過離心操作對(duì)樣本進(jìn)行初步去除雜質(zhì)；再用0.22um微孔濾膜對(duì)樣本進(jìn)行進(jìn)一步的去除雜質(zhì)；

2)、分離外泌體：將經(jīng)過初步處理的樣本通過進(jìn)樣器或進(jìn)樣泵通入微流體芯片，進(jìn)行特異性分離捕獲外泌體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法，其特征在于，所使用的微流體芯片為具有蛇形分離通道，在所述蛇形分離通道上設(shè)置交叉排列的微柱陣列，所述微柱陣列頂部可為圓形、三角形、四邊形等多邊形中的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法，其特征在于，

所述樣本預(yù)處理方法的步驟：離心機(jī)4度條件下300×g離心10min，后2000×g離心20min后棄沉淀，再l0000×g離心30min后棄沉淀，再用0.22μm的濾膜過濾。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法，其特征在于，所用的PBS緩沖液的濃度為0.01mol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法，其特征在于，所述樣本通入芯片的流速為5-50ul/min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用微流體芯片分離外泌體的方法，其特征在于，所用鑒定方法為掃描電鏡和Western Blot分析。