[發明專利]一種用于檢測婦科慢性盆腔炎的試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 201710158170.6
• 申請日: 2016-05-08
• 公開（公告）號: CN106701773A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 楊嶺燕
• 申請（專利權）人: 楊嶺燕
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及醫學檢測領域，特別涉及一種用于婦科中慢性盆腔炎診斷用的適配子及其試劑盒。

背景技術

慢性盆腔炎是指女性內生殖器及其周圍結締組織、盆腔腹膜的慢性炎癥。其主要臨床表現為月經紊亂、白帶增多、腰腹疼痛及不孕等，如已形成慢性附件炎，則可觸及腫塊。癥狀可見：1)慢性盆腔痛：慢性炎癥形成的瘢痕粘連以及盆腔充血，常引起下腹部墜脹、疼痛及腰骶部酸痛。常在勞累、性交后及月經前后加劇。2)不孕及異位妊娠：輸卵管粘連阻塞可致不孕和異位妊娠。急性盆腔炎后不孕發生率為20％～30％。3)月經異常：子宮內膜炎常有月經不規則；盆腔淤血可致經量增多；卵巢功能損害時可致月經失調。4)全身癥狀：多不明顯，有時僅有低熱，易感疲倦。由于病程時間較長，部分患者可出現神經衰弱癥狀，如精神不振、周身不適、失眠等。當患者抵抗力差時，易有急性或亞急性發作。體征，若為子宮內膜炎，子宮增大、壓痛；若為輸卵管炎，則在子宮一側或兩側觸到呈索條狀的增粗輸卵管，并有輕度壓痛。若為輸卵管積水或輸卵管卵巢囊腫，則在盆腔一側或兩側觸及囊性腫物，活動多受限。若為盆腔結締組織炎時，子宮常呈后傾后屈，活動受限或粘連固定，子宮一側或兩側有片狀增厚、壓痛，宮骶韌帶常增粗、變硬，有觸痛。

盆腔炎的檢查主要分為以下三步：第一步檢查臨床癥狀。第二步白帶常規檢查,這項檢查主要是檢查陰道清潔度、細菌性陰道病包括霉菌、滴蟲等。第三步B超檢查,利用B超檢查可以識別來自輸卵管、卵巢及腸管粘連一起形成的包塊或膿腫有85％的準確性。但輕度或中等度的盆腔炎很難在B型超聲影象中顯示出特征。如果進行以上三項檢查之后，并未發現明顯的盆腔炎特征，還可以做相關的輔助檢查以確診是否患有盆腔炎。臨床上，主要有以下三項輔助檢查：第一項放射性同位素掃描近年來有人采用67鎵或111銦標記的白細胞作掃描以診斷腹腔膿腫，取得較高的準確率，應用111銦作掃描，準確率可高達85～100％。但目前臨床上尚少應用，第二項超聲檢查如果條件允許，還應給患者作超聲檢查以了解盆腔內有無包塊。如有包塊，看是否為膿腫。此法為非損傷性檢查，簡便易行，可靠性可高達90％以上。第三項計算機斷層掃描(CT)。但是以上檢測，檢測比較耗時，初篩復雜，效率低下，因此具有很大的改進空間。

在現有技術中，已知的宮頸分泌物中，分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量對慢性盆腔炎的診斷價值。通過抽取宮頸管內粘液作SIgA定量測定，盆腔炎病人的SIgA平均含量可以達到166.8mg/L，而正常婦女的結果為約9.8mg/L，二者差異顯著，因此，通過定量分析宮頸分泌物中SIgA的含量可以初步用來判斷時候患有慢性盆腔炎。

雖然可以采用抗體通過酶聯免疫反應來定量分析宮頸分泌物中SIgA的含量，但是該方法對抗體的要求比較高，并且檢測成本也比較高，因此，對于貧窮落后地區，并不適宜大面積推廣。

SELEX技術是20世紀90年代初發展起來的一種新的組合化學技術。利用該技術可以從隨機單鏈寡核苷酸庫中篩選到特異性與靶物質高度親和的核酸適配體。其基本思路是體外化學合成一個單鏈寡核苷酸庫，與靶物質混合，形成靶物質-核酸復合物，洗脫未結合的核酸，分離與靶物質結合的核酸分子，并以此核酸分子為模板進行PCR擴增，再進入下輪的篩選。通過重復的篩選與擴增，一些與靶物質不結合或與靶物質有低親和力、中親和力的核酸分子被洗去，而與革G物質有強親和力的核酸分子從非常大的隨機庫中分尚出來，且純度隨SELEX過程的進行而增高，最后占據庫的大多數(>90％左右)。自Tuerk和Ellington等首先運用此技術篩選到特異性吸附噬菌體T4DNA聚合酶和有機染料分子的特異核酸適配體后，經過十幾年的發展，SELEX技術已經成為一種重要的研宄手段和工具。因此，采用selex技術，篩選特定的結合SIgA的適配體，進而將適配體制備成為特異性檢測SIgA含量的試劑盒具有較為重要的意義。

發明內容

本發明的技術方案通過以下步驟實現：

本發明的目的是提供一種SIgA的核酸適配體序列。

本發明中，所述的SIgA的核酸適配體(序列1-15)能夠特異結合SIgA。

本發明的進一步的目的是提供所述核酸適配體序列的用途。本發明中根據對該序列應用，可進一步用于制備特異性結合SIgA的試劑盒。