[發明專利]抗水稻白背飛虱基因WBPH2的分子標記及應用有效
| 申請號： | 201710158024.3 | 申請日： | 2017-03-16 |
| 公開（公告）號： | CN106754910B | 公開（公告）日： | 2019-11-19 |
| 發明（設計）人： | 曾大力;錢前;李家洋;代麗萍;郭龍彪;張光恒;朱麗;胡江;董國軍;任德勇;高振宇;陳光 | 申請（專利權）人： | 中國水稻研究所 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 33212 杭州中成專利事務所有限公司 | 代理人： | 金祺<國際申請>=<國際公布>=<進入國 |
| 地址： | 310006 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 水稻 白背飛虱 基因 wbph2 分子 標記 應用 | ||
1.與水稻抗白背飛虱基因相連鎖的分子標記，以水稻作為物種，其特征是：所述分子標記引物選自下列引物對，其中的核苷酸序列為5′→3′，
WBC2-12正向：GCGAGGTCACGAGGACTATC
反向：TCTCGGAAGTCGAGGAACTG；
WBC2-20正向：AACAATTTTTATCTGCGTCATACA
反向：TTCGTGATTTCCTTCCTAACC。
2.根據權利要求1所述的與水稻抗白背飛虱基因相連鎖的分子標記，其特征是：所述WBC2-12定位于水稻第2染色體上；所述WBC2-20定位于水稻第2染色體上。
3.如權利要求1或2所述的分子標記的用途，其特征是：用于水稻白背飛虱抗性品種的鑒定和/或水稻抗白背飛虱后代的輔助選擇育種；
所述分子標記的引物選自以下引物對，其中，
WBC2-12左翼引物序列：GCGAGGTCACGAGGACTATC
右翼引物序列：TCTCGGAAGTCGAGGAACTG；
WBC2-20左翼引物序列：AACAATTTTTATCTGCGTCATACA
左翼引物序列：TTCGTGATTTCCTTCCTAACC；
所述引物進行PCR擴增時，反應體系為：水稻基因組DNA 20ng/ul 1ul，10×PCR Buffer2.0ul，25mM MgCl2 2.0ul，2mMdNTP 2.0ul，10uM引物2.0ul，5U/ul Taq DNA聚合酶0.2ul，ddH2O 10.8ul，總體系20ul；
反應程序為：95℃變性5分鐘；94℃變性1分鐘，55℃退火1分鐘，72℃延伸1分鐘，40個循環；72℃補齊10分鐘。
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