[發明專利]植物EBF2蛋白及其編碼基因在構建耐低溫植物中的應用

在審

• 申請號: 201710157865.2
• 申請日: 2017-03-16
• 公開（公告）號: CN108623664A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發明（設計）人: 張曉燕;施怡婷;楊淑華;姜博晨;郭紅衛
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/82
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

本發明涉及基因工程及分子生物學領域，具體公開了植物EBF2蛋白及其編碼基因在構建耐低溫植物中的應用。本發明經過研究發現，在植物中過表達EBF2基因能顯著提高植物耐低溫能力。本發明提供的EBF2蛋白及其編碼基因的這一新應用，為培育耐低溫植物新品種提供新的種質資源，同時對于研究植物低溫應答響應分子機制和提高植物抗逆性研究奠定了一定的理論基礎。

技術領域

本發明涉及基因工程及分子生物學領域，涉及植物EBF2蛋白及其編碼基因在構建耐低溫植物中的應用。

背景技術

隨著世界生態環境的日益破壞，人均可耕地面積的逐年減少，糧食安全問題也日益突出。非生物逆境嚴重影響著植物的生長發育和作物產量，對糧食安全存在巨大的威脅。同時，由于植物的固有的固定性，對外界可變環境變化十分敏感，低溫環境更是制約植物生長發育的主要非生物逆境，因此，從分子生物學角度研究植物對低溫環境如何應對低溫侵害，了解低溫環境下植物生理生化變化，對培育植物耐寒新品種顯得尤為重要。

擬南芥作為植物學研究中的模式植物，有著生長周期短，基因組較小并且最早完成全部基因組測序等優勢，成為植物分子生物學研究的主要對象。以擬南芥為模式，研究植物具體響應地位脅迫的分子機制和影響其主要生理生化過程中的主效因子，可以通過過表達相關基因在擬南芥野生型植株中，運用相應實驗方法檢測該轉基因植株較野生型耐低溫能力是否發生變化，能有效的發掘低溫相關的優質基因資源，從而為進一步改善植物耐低溫能力和培育作物耐低溫新品種提供一定的理論依據。

發明內容

為了解決現有技術的問題，本發明的目的是提供植物EBF2蛋白及其編碼基因在構建耐低溫植物中的應用。

為了實現本發明目的，本發明的技術方案如下：

本發明首先提供了EBF2蛋白在構建耐低溫植物中的應用，具體為：通過提高EBF2蛋白在植物中的表達量，獲得耐低溫的轉基因植物；

其中，EBF2蛋白的氨基酸序列為：

i)SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；或

ii)由SEQ ID No.1經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與SEQ ID No.1具有相同功能的氨基酸序列。

進一步地.本發明提供了EBF2基因(前述EBF2蛋白的編碼基因)在構建耐低溫植物中的應用，具體為：通過在植物中過表達EBF2基因，獲得耐低溫的轉基因植物；

其中，EBF2基因的核苷酸序列為：

i)SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；

ii)SEQ ID No.2所示的核苷酸序列經取代、缺失和/或增加一個或多個核苷酸且表達相同功能蛋白質的核苷酸序列；或

iii)在嚴格條件下與SEQ ID No.2所示序列雜交的核苷酸序列；

SEQ ID No.2所示的EBF2基因由2769個堿基組成，該基因的讀碼框為自5’端第139位到第2179位堿基。該基因讀碼框由2個外顯子和1個內含子組成，讀碼框第1位到第25位堿基，第195位到第2041位堿基為內含子序列，其余為其內含子序列。EBF2基因來源于哥倫比亞生態型擬南芥，在擬南芥基因組數據庫中的編號為AT5G25350。

由EBF2基因編碼的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。應當理解，本領域技術人員可根據本發明公開的氨基酸序列，在不影響其活性的前提下，取代、缺失和/或增加一個或幾個氨基酸，得到所述蛋白的突變序列。

應理解，考慮到密碼子的簡并性及不同物種密碼子的偏愛性，本領域技術人員可以根據需要使用適合特定物種表達的密碼子。