[發(fā)明專利]一種快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710157057.6
• 申請(qǐng)日: 2017-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN106967796A
• 公開（公告）日: 2017-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃文;張勇;胡超群
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12Q1/02;G01N21/64
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司44001
• 代理人: 劉明星

1.一種快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)獲取待測(cè)水生動(dòng)物的父本或母本的體液或血液，制成第一參考細(xì)胞懸液；

(2)取步驟(1)所述第一參考細(xì)胞懸液，使用DAPI染色液染色，經(jīng)熒光檢測(cè)儀檢測(cè)，記錄第一參考細(xì)胞懸液的熒光值；

(3)抽取待測(cè)水生動(dòng)物的體液或血液，制成待測(cè)細(xì)胞懸液；

(4)取步驟(3)所述待測(cè)細(xì)胞懸液，使用DAPI染色液染色，經(jīng)熒光檢測(cè)儀檢測(cè)，記錄待測(cè)細(xì)胞懸液的熒光值；

(5)將步驟(4)所述待測(cè)細(xì)胞懸液的熒光值與步驟(2)所述第一參考細(xì)胞懸液的熒光值進(jìn)行比較，即可判斷出待測(cè)水生動(dòng)物的基因組倍性。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法，其特征在于，所述熒光檢測(cè)儀采用可激發(fā)DAPI染料的通道。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法，其特征在于，所述熒光檢測(cè)儀為流式細(xì)胞儀或倍性分析儀。

4.一種快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)獲取待測(cè)水生動(dòng)物的父本或母本的體液或血液，制成第一參考細(xì)胞懸液；

(2)取步驟(1)所述第一參考細(xì)胞懸液，使用DAPI染色液染色，經(jīng)熒光檢測(cè)儀檢測(cè)，記錄第一參考細(xì)胞懸液的熒光值；

(3)獲取基因組大小已知的參考物種個(gè)體的體液或血液，制成第二參考細(xì)胞懸液；

(4)取步驟(3)所述第二參考細(xì)胞懸液，使用DAPI染色液染色，經(jīng)熒光檢測(cè)儀檢測(cè)，記錄第二參考細(xì)胞懸液的熒光值；

(5)抽取待測(cè)水生動(dòng)物的體液或血液，制成待測(cè)細(xì)胞懸液，將其與步驟(3)所述第二參考細(xì)胞懸液加入到裝有DAPI染色液的容器中染色，經(jīng)熒光檢測(cè)儀檢測(cè)，得到雙峰直方圖后記錄熒光值；若無(wú)雙峰直方圖，則更換步驟(3)所述的參考物種；

(6)雙峰直方圖由參考物種的直方圖和待測(cè)水生動(dòng)物的直方圖組成，根據(jù)兩者的差距，結(jié)合步驟(2)所述第一參考細(xì)胞懸液的熒光值，即可判斷出待測(cè)水生動(dòng)物的基因組倍性。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法，其特征在于，所述熒光檢測(cè)儀采用可激發(fā)DAPI染料的通道。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的快速批量化測(cè)定水生動(dòng)物基因組倍性的方法，其特征在于，所述熒光檢測(cè)儀為流式細(xì)胞儀或倍性分析儀。