[發明專利]兩色金雞菊提取物在制備治療血栓形成性疾病藥物中的應用

在審

• 申請號: 201710156606.8
• 申請日: 2017-03-16
• 公開（公告）號: CN107007643A
• 公開（公告）日: 2017-08-04
• 發明（設計）人: 毛新民;李新霞;李琳琳;鄧凱;王燁
• 申請（專利權）人: 新疆醫科大學
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P7/02
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司11249
• 代理人: 鐘國

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及兩色金雞菊提取物在制備治療血栓形成性疾病藥物中的應用。

背景技術

金雞菊（Coreopsis tinctoria Nuff.）又名雪菊，系菊科（compositae）金雞菊屬（Coreopsis）的干燥頭狀花序，單瓣、重瓣或半重瓣，舌狀花黃色或金黃色，花期6～9月。大花金雞菊屬于北溫帶植物，原產于北美，弗羅里達州及墨西哥州，我國1936年作為觀賞植物引種子至廬山、南岳等地栽培，目前各地除供觀賞外，還用全草入藥，而且從花中提取的食用色素，具有清熱解毒和降壓之功效。新疆金雞菊廣泛分布于和田地區海拔高3000米左右的昆侖山區，有較豐富的野生資源，在民間經常將其干花用來泡茶。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有的缺陷，提供了一種兩色金雞菊提取物在制備治療血栓形成性疾病藥物中的應用。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

兩色金雞菊提取物在制備治療血栓形成性疾病藥物中的應用，所述兩色金雞菊提取物為兩色金雞菊的乙醇提取物。所述治療血栓形成性疾病藥物為抗凝血藥物。所述兩色金雞菊提取物可通過抑制血栓素B2（TXB₂）生成、促進6酮-前列腺素F1α（6-Keto-PG）生成、抑制二磷酸腺苷（ADP）誘導的血小板聚集達到抗凝血功能。

優選地，所述的乙醇提取物通過包括如下步驟的方法得到：兩色金雞菊先用濃度為50～80vt%的乙醇溶液浸漬5～15h，再于50～80℃回流提取，提取液濃縮、干燥。

優選地，回流提取的料液比為1:10～20。

兩色金雞菊提取物在制備治療血栓形成性疾病藥物中的應用，所述治療血栓形成性疾病藥物為抗凝血藥物，通過抑制血栓素B2生成、促進6酮-前列腺素F1α生成、抑制由二磷酸腺苷誘導的血小板聚集、抑制由膠原蛋白（COL）誘導的血小板聚集達到抗凝血功能，所述兩色金雞菊提取物通過如下方法得到：

（1）兩色金雞菊的乙醇提取物過大孔樹脂柱，依次用水、乙醇溶液洗脫，收到乙醇洗脫液；

（2）步驟（1）的乙醇洗脫液過聚酰胺柱，用乙醇溶液洗脫，得到的洗脫液濃縮、干燥。

優選地，步驟（1）洗脫所用的乙醇溶液濃度為50～80vt%，步驟（2）洗脫所用的乙醇溶液濃度為10～70vt%。

本文中，以ETE表示兩色金雞菊的乙醇提取物，以ETEP表示ETE進一步經過上述大孔樹脂和聚酰胺處理后得到的部位。

藥效學實驗

兩色金雞菊乙醇提取物（ETE）對大鼠急性血栓模型的影響

材料與儀器

分組及給藥

將72只Sprague Dawley大鼠按體重隨機分成6組，每組12只雌雄各半，即空白組、急性血栓模型組、阿司匹林組（拜阿司匹林10mg/kg）、高劑量組（ETE1.2g/kg）、中劑量組（ETE0.6g/kg）、低劑量組（ETE0.3g/kg），灌胃給藥，空白組和模型組大鼠灌胃給予等體積的空白溶劑。給藥21天，每天一次，灌胃量10ml/kg。

急性血栓模型的建立

末次給藥1h后，腹腔注射4%戊巴比妥鈉（40mg/kg）麻醉，分離左側頸總動脈。將吸有20%三氯化鐵的1cm×1cm的濾包裹分離出的頸總動脈，計時20min后取下。空白組用生理鹽水浸泡濾紙，結扎紙小片兩側血管取下血栓稱重并做病理切片；腹主動脈取血，EDTA抗凝血測定血漿TXB₂及血漿6-Keto-PG；3.8%枸櫞酸鈉抗凝血（枸櫞酸鈉：全血為1:9，v/v）用于APTT、PT、TT和FIB含量的測定。

統計學方法

采用SPSS17.0軟件包對數據進行處理。結果以表示，數據先進行正態性檢驗，符合正態分布組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，p＜0.05為具有統計學意義。

實驗結果

凝血四項及平均栓重結果

凝血四項及平均栓重結果見表1。

表1 各組凝血四項及平均栓重的結果（n=12）

注：*與空白組比較P＜0.05，**與空白組比較P＜0.01

#與模型組比較P＜0.05，##與模型組比較P＜0.01