[發(fā)明專利]一種海參內(nèi)臟制備海參肽和海參多糖的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710156139.9
• 申請日: 2017-03-16
• 公開（公告）號: CN107083413A
• 公開（公告）日: 2017-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖美添;楊東達;黃雅燕;葉靜;張娜;張學勤
• 申請（專利權(quán)）人: 華僑大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/30;C07K1/34;C08B37/00
• 代理公司: 泉州市文華專利代理有限公司35205
• 代理人: 張浠娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及海參廢棄物資源化利用領(lǐng)域，具體涉及從海參內(nèi)臟中提取海參肽和海參多糖的方法。

背景技術(shù)

海參(sea cucumber)為棘皮動物門(Echinodermata)海參綱 (Holothurioider)動物的總稱，是重要的海洋無脊椎動物，全世界約有1100 多種，我國海域約有140余種，海參同人參、燕窩、魚翅齊名，被列為八大珍品之一。中醫(yī)認為，海參性味甘、咸、溫，入心、腎精，有補腎益精、養(yǎng)血潤燥之功效。海參體內(nèi)含有海參多肽、海參多糖、脂肪、海參皂苷、維生素、腦苷脂等活性組分，具有延緩衰老、增強免疫力、抗腫瘤、抗凝血等活性，具有較高的藥用價值和醫(yī)用價值。

一般人們食用的海參都是海參體壁，而非海參內(nèi)臟。在海參加工過程中，有大量的海參內(nèi)臟作為下腳料被遺棄，然而海參內(nèi)臟也含有豐富的蛋白質(zhì)和多糖及其他多種活性成分。研究表明，海參多糖是海參體內(nèi)最重要的活性物質(zhì)之一，且具有抗凝血、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老、降血脂等多種生物活性。Lee等分別比較紅海參和灰海參內(nèi)臟中氨基酸的組成及含量，發(fā)現(xiàn)海參蛋白中含有17種氨基酸，8種必需氨基酸和9種非必需氨基酸，由此說明海參內(nèi)臟可以為海參肽的制備提供優(yōu)質(zhì)的蛋白來源。

海參多肽具有良好的穩(wěn)定性及溶解性，食用安全，易消化吸收，且具有降血壓、抗疲勞、提高免疫力、抗氧化等多種生物活性。現(xiàn)有文獻報道，海參肽的生物活性與其分子量密切相關(guān)，房堃等將酶解得到的海參肽通過超濾進行分離并研究其抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)分子量在3000Da以下及3000Da 以上的海參肽均具有較強的清除超氧陰離子的活性，而3000Da以下的海參肽具有更強的清除羥自由基活性，說明不同分子量段的海參肽具有不同的生物活性。因此，從海參內(nèi)臟中提取活性組分，將大大提高海參的綜合開發(fā)利用價值，降低海參資源的浪費，具有顯著的經(jīng)濟效益和社會效益。

目前，國內(nèi)外專利對于海參內(nèi)臟的開發(fā)均有所涉及。(1)專利 EP20110840702公開了一種海參復(fù)合制劑的制備方法，其效果好于單一制劑；(2)專利CN201210101836公開了一種以海參內(nèi)臟為原料，采用生物酶解技術(shù)提取海參多糖、海參多肽的方法；(3)專利CN104137996A提供了一種海參內(nèi)臟的處理加工方法，制成低分子、高活性的海參肽粉，可應(yīng)用于食品及保健品領(lǐng)域；(4)專利CN104207088A公開了一種海參內(nèi)臟蛋白制備海鮮調(diào)味品的方法，制得的產(chǎn)品具有獨特的鮮味和香氣，且富含必需氨基酸和活性多肽等營養(yǎng)成分，易于儲藏和運輸；(5)專利CN105177095A 公開了一種高效制備海參抗氧化活性肽的方法，所得海參多肽的羥自由基清除能力和總還原力明顯高于目前廣泛使用的抗氧化劑。

目前，專利中未見以海參內(nèi)臟為原料，制備海參多糖和海參肽，同時實現(xiàn)海參多肽的分級分離的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡單、設(shè)計合理的從海參內(nèi)臟中同時提取海參肽和海參多糖的方法，充分利用海參加工時被丟棄的海參內(nèi)臟，減少對環(huán)境的污染，達到變廢為寶的目的。

為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，其技術(shù)方案如下列步驟所述：

一種海參內(nèi)臟制備海參肽和海參多糖的方法，包括如下步驟：

⑴預(yù)處理：將海參內(nèi)臟清洗后，進行冷凍干燥，并進行粉碎，采用篩網(wǎng)過濾得到海參內(nèi)臟粉；

⑵酶解：稱取海參內(nèi)臟粉并配置成溶液，溶液中海參內(nèi)臟粉的質(zhì)量濃度為0.5-10.0％，溶液溫度25-55℃，加酶量10-100U/mg，調(diào)節(jié)溶液的pH 為6.5-8.5，進行酶解，酶解時間5.0-10h；

⑶滅酶：滅酶溫度在85-95℃，滅酶時間5-20min，滅酶后冷卻至室溫；

⑷離心分離：將步驟(3)所得到的料液進行離心分離，得到上清液和濾渣，取上清液進行濃縮得到濃縮液；

⑸醇沉：將步驟(4)所得的濃縮液，按濃縮液與乙醇體積比為1:1-1:6 配比加入乙醇進行醇沉，靜置2-12h；

⑹離心分離：將步驟(5)所得的已分層的物料離心分離，所得沉淀物為海參粗多糖，上清液進行濃縮和冷凍干燥，得到海參肽粗粉；

⑺納濾：將步驟(6)所得的海參肽粗粉按海參肽粗粉按1-2％的濃度溶解，采用截留分子量為100Da的納濾膜進行納濾，壓力為0.5-2.5MPa，收集濃縮液；

⑻超濾：將步驟(7)得到的濃縮液，采用截留分子量為2000Da的超濾膜進行超濾，壓力為1.5-2.5MPa，分別收集濃縮液和透過液，分別進行冷凍干燥，分別得到海參多肽(分子量為2000-5000Da)和寡肽(分子量<2000 Da)；