[發明專利]自然殺傷細胞活性測定方法有效
| 申請號： | 201710155968.5 | 申請日： | 2017-03-16 |
| 公開（公告）號： | CN107064085B | 公開（公告）日： | 2021-05-11 |
| 發明（設計）人： | 張斌;湯永永;陳虎 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍三〇七醫院 |
| 主分類號： | G01N21/64 | 分類號： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京市振邦律師事務所 11389 | 代理人： | 汪妍瑜 |
| 地址： | 100071 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 自然 殺傷 細胞 活性 測定 方法 | ||
1.一種自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于包括以下步驟：
1)將靶細胞K562傳代培養；
2)對效應細胞中自然殺傷細胞比例進行分析；
3)設定效靶比，所述效靶比為NK細胞與靶細胞之比，依據效應細胞有核細胞密度、效應細胞活率及其有核細胞中NK細胞比例計算所需效應細胞體積，將靶細胞與效應細胞按照設定的效靶比進行培養；
4)檢測步驟3)中培養的靶細胞死亡率；
5)將步驟4)中靶細胞死亡率帶入公式計算自然殺傷細胞活性：
自然殺傷細胞活性＝(待測靶細胞死亡率-對照組靶細胞死亡率)/(1-對照組靶細胞死亡率)╳100％。
2.如權利要求1所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，步驟3)中的效靶比為4以上。
3.如權利要求1所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，步驟1)中對傳代細胞進行密度和/或死亡率的質量控制。
4.如權利要求1所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，步驟2)中對效應細胞進行細胞密度、活細胞率及自然殺傷細胞比例至少之一的質量控制。
5.如權利要求3所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，所述質量控制包括將傳代培養的靶細胞進行染料標記。
6.如權利要求4所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，包括用抗體對自然殺傷細胞進行標記。
7.如權利要求3所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，控制靶細胞自然死亡率在3％以內。
8.如權利要求3所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，靶細胞與效應細胞FH1通道平均熒光強度值之比為80倍以上。
9.如權利要求1-8之一所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，在步驟4)中將與僅有靶細胞對照管相比，效靶細胞混合孵育檢測管內靶細胞濃度低于前者85％的檢測結果舍去。
10.如權利要求1所述的自然殺傷細胞活性測定方法，其特征在于，依據檢測對象是否患過腫瘤選擇效靶比。
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