[發明專利]基因檢測試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201710154116.4
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN108004326A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 盛司潼;高虹
• 申請（專利權）人: 廣州康昕瑞基因健康科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6869
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及基因工程及分子生物學領域，提供一種基因檢測試劑盒，包括用于對含待測位點的核酸片段進行特異性擴增的引物組，所述待測位點為CYP2C9基因上的rs1799853位點、rs1057910位點，VKORC1基因上的rs9923231位點中的至少一種，所述引物組包括rs1799853引物組、rs1057910引物組、rs9923231引物組中的至少一種。本發明還提供了一種基因檢測方法。本發明的試劑盒通過采用特異性擴增引物組對含上述待測位點的核酸片段進行擴增，使得對CYP2C9基因和VKORC1基因突變的檢測靈敏度高、假陽性率低；本發明的試劑盒采用第二代高通量基因測序技術進行檢測，使得檢測周期短，通量高。

技術領域

本發明涉及基因工程及分子生物學領域，更具體地說，涉及一種基因檢測試劑盒及檢測方法。

背景技術

華法林（warfarin）是香豆素類口服抗凝血藥，目前被廣泛應用于多種疾病的抗凝以及預防和治療血栓栓塞中，但是因為華法林的有效血藥濃度范圍狹窄，劑量偏小會降低治療血栓形成的效果，劑量偏大則會增大出血的風險，甚至引發大出血等副作用。已知與華法林的藥效學和藥動學相關的基因達30余種，細胞色素2C9(CYP2C9)和微生物K環氧化物還原酶復合物（VKORC1）基因的多態性是影響華法林用量個體差異最主要的遺傳因素。通過對患者的基因CYP2C9、VKORC1進行檢測，得到特定位點的基因型，以基因檢測結果作為中間結果的信息的方法，不屬于疾病的診斷方法；以基因型的檢測結果來確定華法林需求的維持劑量，就可以實現個體化用藥，既可避免劑量不夠造成血栓，又可防止劑量過大引起出血并發癥。

目前常用的CYP2C9基因和VKORC1基因突變檢測方法主要有Taqman熒光探針法。但Taqman熒光探針法靈敏度低、假陽性率高、耗時較長，通量小。

因此，需要一種新的檢測CYP2C9基因和VKORC1基因突變的試劑盒及檢測方法，使得對CYP2C9基因和VKORC1基因突變的檢測靈敏度高、假陽性率低，且檢測周期短，通量高。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基因檢測試劑盒及檢測方法，旨在解決現有技術中CYP2C9基因和VKORC1基因檢測靈敏度低、假陽性率高、周期長，通量小的技術問題。

一種基因檢測試劑盒，包括用于對含待測位點的核酸片段進行特異性擴增的引物組，所述待測位點為CYP2C9基因上的rs1799853位點、rs1057910位點，VKORC1基因上的rs9923231位點中的至少一種，所述引物組包括rs1799853引物組、rs1057910引物組、rs9923231引物組中的至少一種；

所述rs1799853引物組用于特異性擴增含rs1799853位點的核酸片段，包括rs1799853上游引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及rs1799853下游引物SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8；

所述rs1057910引物組用于特異性擴增含rs1057910位點的核酸片段，包括rs1057910上游引物SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12，以及rs1057910下游引物SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:16；

所述rs9923231引物組用于特異性擴增含rs9923231位點的核酸片段，包括rs9923231上游引物SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19或SEQ ID NO:20，以及rs9923231下游引物SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:24。