[發(fā)明專利]KRAS基因檢測試劑盒及檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710153617.0
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN108070661A
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盛司潼;姚瑤
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州康昕瑞基因健康科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6869
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種KRAS基因檢測試劑盒，包括用于對多個KRAS基因待測位點(diǎn)中的至少一個進(jìn)行特異性擴(kuò)增的引物組，其特征在于，所述多個KRAS基因待測位點(diǎn)包括rs121913530、rs121913529、rs121913535、rs397517040、rs121913240、rs17851045；

用于特異性擴(kuò)增含rs121913530、rs121913529、rs121913535、rs397517040中至少一種位點(diǎn)的片段的引物組包括上游引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及下游引物SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8；

用于特異性擴(kuò)增含rs121913240和/或rs17851045位點(diǎn)的片段的引物組包括上游引物SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12，以及下游引物SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:16。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的KRAS基因檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括R接頭，所述R接頭為具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的單鏈核酸分子，用于與含待測位點(diǎn)的擴(kuò)增產(chǎn)物連接。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的KRAS基因檢測試劑盒，其特征在于，所述R接頭序列為SEQ IDNO:17。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的KRAS基因檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括F接頭，所述F接頭包括由SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19組成的F1接頭、由SEQ ID NO:20和SEQ IDNO:21組成的F2接頭、由SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:23組成的F3接頭、由SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:25組成的F4接頭、由EQ ID NO:26和SEQ ID NO:27組成的F5接頭中的至少一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的KRAS基因檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括單分子擴(kuò)增引物組SEQ ID NO:28和SEQ ID NO:29，所述單分子擴(kuò)增引物組用于特異性擴(kuò)增含待測位點(diǎn)、F接頭以及R接頭的核酸片段。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的KRAS基因檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括測序引物，所述測序引物包括SEQ ID NO:30和/或SEQ ID NO:31，所述測序引物的5’末端經(jīng)磷酸修飾；所述測序引物SEQ ID NO:30用于檢測含rs121913530、rs121913529、rs121913535、rs397517040中的至少一個位點(diǎn)，所述測序引物SEQ ID NO:31用于檢測含rs121913240和/或rs17851045位點(diǎn)。