[發明專利]ALDH2基因檢測試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201710153613.2
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN108018348A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發明（設計）人: 盛司潼;高虹
• 申請（專利權）人: 廣州康昕瑞基因健康科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6869;C12Q1/6806
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種ALDH2基因檢測試劑盒，包括用于對含rs671位點的核酸片段進行特異性擴增的引物組，其特征在于，所述引物組包括上游引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及下游引物SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。

2.根據權利要求1所述的ALDH2基因檢測試劑盒，其特征在于，所述ALDH2基因檢測試劑盒還包括接頭，所述接頭包括接頭A、接頭B、接頭C、接頭D中的至少一種；所述接頭A由SEQID NO:9和SEQ ID NO:10組成；所述接頭B由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12組成；所述接頭C由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14組成；所述接頭D由SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16組成。

3.根據權利要求1所述的ALDH2基因檢測試劑盒，其特征在于，所述ALDH2基因檢測試劑盒還包括測序引物SEQ ID NO:17，所述測序引物用于對含rs671位點的文庫分子進行測序。

4.根據權利要求3所述的ALDH2基因檢測試劑盒，其特征在于，所述測序引物的5’末端經過磷酸化修飾。

5.一種ALDH2基因檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、利用擴增引物組，對含rs671位點的樣本進行擴增，得擴增產物；其特征在于，所述引物組包括上游引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及下游引物SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8；

B、在所述擴增產物上連接接頭，得到文庫分子；

C、采用第二代高通量基因測序技術對所述文庫分子進行測序，確定rs671位點的基因型。

6.根據權利要求5所述的ALDH2基因檢測方法，其特征在于，所述步驟A包括以下步驟：

A1、采用第一引物組擴增ALDH2基因片段，得第一擴增產物；所述第一引物組包括第一上游引物SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2，以及第一下游引物SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6；；

A2、以第一擴增產物為模板，采用第二引物組擴增含rs671位點的核酸片段，得第二擴增產物；所述第二引物組包括第二上游引物SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及第二下游引物SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。

7.根據權利要求6所述的ALDH2基因檢測方法，其特征在于，所述步驟B中還包括向第二擴增產物中加入USER酶進行切割的步驟，所述第二擴增產物經USER酶切割形成第一粘性末端。

8.根據權利要求5所述的ALDH2基因檢測方法，其特征在于，所述接頭包括接頭A、接頭B、接頭C、接頭D中的至少一種；所述接頭A由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10組成；所述接頭B由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12組成；所述接頭C由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14組成；所述接頭D由SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16組成。

9.根據權利要求5所述的ALDH2基因檢測方法，其特征在于，步驟C中用于對含rs671位點的文庫分子進行測序的測序引物為SEQ ID NO:17。

10.根據權利要求9所述的ALDH2基因檢測方法，其特征在于，所述測序引物的5’末端經過磷酸化修飾。