[發明專利]一種基于聚集誘導發光原理用于選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑的合成及應用

有效

• 申請號: 201710153023.X
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN106905199B
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發明（設計）人: 王建國;姜國玉;朱溫平;吳勇權;范小林
• 申請（專利權）人: 贛南師范大學
• 主分類號: C07C303/38
• 分類號: C07C303/38;C07C311/21;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 贛州智府晟澤知識產權代理事務所(普通合伙)36128
• 代理人: 鄒圣姬

1.一種選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑，其特征在于：所述選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑具有如下結構：

2.根據權利要求1所述的選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑，其特征在于：含有四苯乙烯結構作為熒光信號基團。

3.根據權利要求1所述的選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑，其特征在于：含有2,4-二硝基苯磺酰基結構作為熒光猝滅基團和巰基響應基團。

4.根據權利要求1所述的選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑的合成方法，其特征在于：包括如下步驟：

第一步：二苯甲酮在四氯化鈦和鋅粉的作用下發生McMurry反應，生成具有聚集誘導發光特性的化合物1；

第二步：化合物1在醋酸，硝酸的作用下發生硝化反應，生成化合物2；

第三步：化合物2在Pd/C催化下被水合肼還原為TPENH₂；

第四步：化合物TPENH₂與2,4-二硝基苯磺酰氯在碳酸鉀作用下發生反應，生成目標化合物TPENNO₂，利用柱層析提純后，目標化合物TPENNO₂的結構經¹HNMR、¹³CNMR和高分辨質譜鑒定。

5.根據權利要求3所述的選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑的合成方法，其特征在于：包括如下步驟：

第一步：二苯甲酮和鋅粉加到四氫呋喃中，攪拌下冷卻到-20℃后半小時，然后緩慢滴入四氯化鈦，在-20℃繼續攪拌半小時后，緩慢升至室溫，然后加熱回流過夜，冷卻，過濾，濃縮后利用柱層析法分離純化，得到具有聚集誘導發光特性的化合物1；

第二步：將化合物1加入醋酸和二氯甲烷中，冷卻到-20℃后，將65％的濃硝酸加到反應液中，在-20℃繼續攪拌15min后，加入冷水分液萃取，有機相用水洗滌三次，干燥濃縮，殘余物用甲醇重結晶得黃色固體化合物2；

第三步：將化合物2、Pd/C加到乙醇中，室溫下攪拌15min，將85％的水合肼加入反應液中回流4h，冷卻后抽濾，濾液濃縮后用甲醇重結晶得還原產物TPENH₂；

第四步：將化合物TPENH₂、碳酸鉀加入乙腈中，冷卻至0℃，之后分批加入2,4-二硝基苯磺酰氯發生反應，生成目標化合物TPENNO₂；經柱層析提純后，目標化合物TPENNO₂的結構經¹HNMR、¹³CNMR和高分辨質譜鑒定。

6.根據權利要求1所述的選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑的應用方法，其特征在于：可選擇性檢測半胱氨酸。

7.根據權利要求1所述的選擇性檢測半胱氨酸的熒光試劑的應用方法，其特征在于：可用于細胞內巰基化合物的檢測。