[發(fā)明專利]一株氯霉素降解菌株LMS-CY及其生產(chǎn)的菌劑和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710152873.8
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN106754578B
• 公開（公告）日: 2019-10-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃星;趙夢君;蔣建東;田云龍;朱昌雄
• 申請（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué);中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境與可持續(xù)發(fā)展研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

本發(fā)明公開了一株氯霉素降解菌株LMS?CY及其生產(chǎn)的菌劑和應(yīng)用。該菌株LMS?CY為革蘭氏反應(yīng)陽性菌，經(jīng)鑒定為類諾卡氏菌屬(Nocardioides sp.)，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏時間為2016年10月24日，保藏編號為CCTCC NO:M 2016591。本發(fā)明經(jīng)分離篩選獲得的氯霉素降解菌株LMS?CY，能將無機(jī)鹽培養(yǎng)基中的氯霉素殘留降解90％以上，同時該菌株制備的降解菌劑能在短時間內(nèi)降解土壤或水體中氯霉素殘留達(dá)85％以上，解決殘留氯霉素對土壤水體環(huán)境、農(nóng)作物和人體健康的危害問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及環(huán)境污染微生物修復(fù)，具體涉及一株氯霉素降解菌株LMS-CY及其生產(chǎn)的菌劑和應(yīng)用。

背景技術(shù)

抗生素作為一類抗菌性藥物廣泛用于預(yù)防和治療人類和動物疾病，并且在畜牧和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中用于促進(jìn)動物的生長，進(jìn)入人和動物體內(nèi)的抗生素不能被生物體完全吸收，部分以原藥或代謝物的形式經(jīng)由尿液和糞便排出體外進(jìn)入環(huán)境中，造成環(huán)境染。由于進(jìn)入環(huán)境的抗生素殘留對生態(tài)環(huán)境和人類健康構(gòu)成威脅，其殘留危害日益收到廣泛關(guān)注。氯霉素是一種廣譜抗菌藥，對革蘭陽性、陰性細(xì)菌均有抑制作用，被廣泛應(yīng)用于人類以及動物的疾病治療，特別對各類家禽、家畜、水產(chǎn)品及蜂蜜制品的各種傳染性疾病的控制和治療起重要作用。中國科學(xué)院廣州化學(xué)地球研究所調(diào)查結(jié)構(gòu)顯示2013年我國氯霉素的使用總量為1230噸。隨著氯霉素使用量的不斷增加，進(jìn)入環(huán)境的氯霉素殘留問題也日趨嚴(yán)重。進(jìn)入土壤的氯霉素及其分解產(chǎn)物往往會從土壤進(jìn)入地下水，造成生產(chǎn)、生活水源的污染。目前，環(huán)境中氯霉素殘留的去除主要是物理化學(xué)方法，如光催化降解、電化學(xué)氧化還原技術(shù)、零價雙金屬納米顆粒吸附法、臭氧氧化法、微波輻射法等，這些方法往往能耗大，成本高。相比之下，微生物修復(fù)方法無二次污染、成本較低，是比較理想的消除環(huán)境中氯霉素污染的方法。

國內(nèi)外對氯霉素抗生素降解菌的報道較少，目前已報道的降解菌僅有假單胞菌屬、克雷伯氏菌屬、嗜血桿菌屬。由于目前報道的氯霉素降解菌株很少，制約了氯霉素污染環(huán)境微生物修復(fù)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展和應(yīng)用。因此，馴化篩選氯霉素高效降解菌株，研究其生物學(xué)特性與降解特性，并應(yīng)用于氯霉素污染環(huán)境的生物治理，對于治理和修復(fù)氯霉素污染具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供一株氯霉素降解菌株LMS-CY，該菌株可以降解氯霉素殘留；本發(fā)明的另一目的是提供該氯霉素降解菌株生產(chǎn)的降解菌劑及其應(yīng)用；該菌株制備的降解菌劑可在短時間內(nèi)使土壤或水體環(huán)境中殘留的氯霉素降解。

技術(shù)方案：為了實(shí)現(xiàn)上述目的，如本發(fā)明所述的一株氯霉素降解菌株LMS-CY，經(jīng)鑒定為類諾卡氏菌屬(Nocardioides sp.)，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：中國.武漢.武漢大學(xué)，郵編：430072，保藏時間為2016年10月24日，保藏編號為CCTCC NO:M2016591。菌株LMS-CY在LB固體平板上菌落形態(tài)為奶油白、菌落邊緣光滑，中間略微凸起。菌株LMS-CY無鞭毛，大小為0.3-0.7μm×1.0-1.6μm，革蘭氏反應(yīng)陽性，可以抗大觀霉素、頭孢氨芐、林可霉素、青霉素。

本發(fā)明所述的菌株LMS-CY在降解氯霉素中的應(yīng)用。降解菌株LMS-CY 16h能將無機(jī)鹽培養(yǎng)基中的氯霉素殘留降解90％以上。

進(jìn)一步地，菌株LMS-CY在降解土壤或水體環(huán)境中氯霉素的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的菌株LMS-CY生產(chǎn)的降解菌劑。

本發(fā)明所述菌株LMS-CY生產(chǎn)的降解菌劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將降解菌株LMS-CY培養(yǎng)到對數(shù)期的試管液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期，制得發(fā)酵菌種；

(2)將上述制得發(fā)酵菌種接種于種子罐的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至對數(shù)生長期，制得種子液；

(3)將種子液接種于生產(chǎn)罐的培養(yǎng)基中培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵完成后的培養(yǎng)液即為降解菌劑。