[發明專利]一種鹿中結核分枝桿菌NASBA-ELISA快速檢測試劑盒及檢測方法有效
| 申請號： | 201710152683.6 | 申請日： | 2017-03-15 |
| 公開（公告）號： | CN106755546B | 公開（公告）日： | 2021-04-30 |
| 發明（設計）人： | 徐亞維;尹銳;薛健;于雙;孫亞娟;王俊玲;楚海嬌;王歡 | 申請（專利權）人： | 吉林農業科技學院 |
| 主分類號： | C12Q1/6804 | 分類號： | C12Q1/6804;C12Q1/6865;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732 | 代理人： | 王燦 |
| 地址： | 132101 吉林省吉*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 結核 分枝桿菌 nasba elisa 快速 檢測 試劑盒 方法 | ||
1.一種鹿中結核分枝桿菌NASBA-ELISA快速檢測試劑盒，其特征是，它包括如下體系：
1)NASBA擴增反應體系，具體包括以下組分：
(a)TB基因的一對特異性引物
IS6110-F:5’-TGATGCAAGGTCGATATGAGAACGGAAAGGTCTCTTCGG-3’，其中TGATGCAAGGTCGATATGAG與檢測探針一致，
IS6110-R:5’-AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAGTCATCCCACACCGCTAAAGC-3’，其中AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAG為T7啟動子序列，
(b)NASBA擴增緩沖液：Tris-HCl為40mmol/L，pH8.5，NTP為10mmol/L，dNTP為1mmol/L，MgC12為10mmol/L，KCl為120mmol/L，DTT為5mmol/L，DMSO為100g/L；
(c)NASBA擴增酶復合液：T7RNA聚合酶80U，SupeScript II反轉錄酶40U，核糖核酸酶H0.2U，20U RNA酶抑制劑；
2)NASBA擴增產物ELISA檢測體系，具體包括以下組分：
(a)TB基因的探針
特異性探針，即捕獲探針：5’-Biotin-AGTAACACGTGGGTGATCTGC-3’，
檢測探針：5’-TGATGCAAGGTCGCATATGAG-DIG-3’；
(b)酶標板包被液和封閉液：鏈霉親和素用pH8.6、0.05mol/L碳酸鹽緩沖液，稀釋為0.0125mg/mL濃度作為酶標板包被液；酶標板封閉液是pH8.6、0.05mol/L碳酸鹽緩沖液和1％BSA混合液；
(c)雜交緩沖液：20×SSPE、pH7.4，50mmol/L Tris-HCl、pH8.5，1﹪(W/V)BSA；(d)雜交抗體：堿性磷酸酶抗地高辛抗體；
(e)NASBA擴增產物ELISA檢測試劑
雜交洗液：PBS、pH7.2，0.05％ Tween-20；
顯色液：3mg pNPP于1mL ddH2O，加入1mL二乙醇胺，-20℃避光保存；
終止液：0.5mol Na2CO3溶液。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于吉林農業科技學院，未經吉林農業科技學院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710152683.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
