[發(fā)明專利]5-氨基戊酸的生物轉(zhuǎn)化方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710152661.X
• 申請(qǐng)日: 2017-03-15
• 公開（公告）號(hào): CN108624632A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡真;翟曉云;張君麗;裴萬(wàn)禮;李寅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所;中國(guó)科學(xué)院大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P13/00
• 分類號(hào): C12P13/00;C12N9/10;C12N9/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.一種5-氨基戊酸的生產(chǎn)方法，是以1,5-戊二胺為底物，通過(guò)氨基轉(zhuǎn)移酶和γ-氨基丁醛脫氫酶將所述1,5-戊二胺轉(zhuǎn)化為5-氨基戊酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：

所述氨基轉(zhuǎn)移酶的氨基酸序列為如下1)或2)的蛋白質(zhì)：

1)由序列表中序列13所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

2)將序列表中序列13所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1)衍生的蛋白質(zhì)；

所述γ-氨基丁醛脫氫酶的氨基酸序列為如下3)或4)的蛋白質(zhì)：

3)由序列表中序列14所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

4)將序列表中序列14所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3)衍生的蛋白質(zhì)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：

所述方法為將1,5-戊二胺、氨基轉(zhuǎn)移酶、γ-氨基丁醛脫氫酶、磷酸吡哆醛、α-酮戊二酸、NAD⁺和緩沖液混勻，得到反應(yīng)體系，反應(yīng)，得到5-氨基戊酸。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：

所述1,5-戊二胺在所述反應(yīng)體系中的濃度為200mM；

所述氨基轉(zhuǎn)移酶在所述反應(yīng)體系中的濃度為0.091U/mL；

所述γ-氨基丁醛脫氫酶在所述反應(yīng)體系中的濃度為0.088U/mL；

所述磷酸吡哆醛在所述反應(yīng)體系中的濃度為0.08mM；

所述α-酮戊二酸在所述反應(yīng)體系中的濃度為200mM；

所述NAD⁺在所述反應(yīng)體系中的濃度為200mM。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：

所述反應(yīng)的條件為30℃反應(yīng)8h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：

所述氨基轉(zhuǎn)移酶由來(lái)源于大腸桿菌的ygjG基因編碼；

或，所述γ-氨基丁醛脫氫酶由來(lái)源于惡臭假單胞菌的adPp基因編碼；

或，所述大腸桿菌為大腸桿菌Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655；

或，所述惡臭假單胞菌為惡臭假單胞菌Pseudomonas putida LS46 Contig14；

或，所述氨基轉(zhuǎn)移酶的編碼基因序列為序列1；

或，所述γ-氨基丁醛脫氫酶的編碼基因序列為序列5。

7.按照權(quán)利要求1-6任一所述的方法制備得到的5-氨基戊酸。

8.權(quán)利要求1-6中任一所述的氨基轉(zhuǎn)移酶和/或權(quán)利要求1-6中任一所述的γ-氨基丁醛脫氫酶在生產(chǎn)5-氨基戊酸中的應(yīng)用。

9.一種用于生產(chǎn)5-氨基戊酸的產(chǎn)品，其包括權(quán)利要求1-6中任一所述的氨基轉(zhuǎn)移酶和/或權(quán)利要求1-6中任一所述的γ-氨基丁醛脫氫酶。

10.權(quán)利要求9所述的產(chǎn)品在生產(chǎn)5-氨基戊酸中的應(yīng)用。