[發(fā)明專(zhuān)利]一種鷹嘴豆肽的制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710151900.X
• 申請(qǐng)日: 2017-03-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106947798A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-07-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范曉光;賈子樊;李志華;邵翅;劉金山
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 樂(lè)康珍泰（天津）生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P21/06
• 分類(lèi)號(hào): C12P21/06;C07K1/14;C07K1/30;C07K1/34
• 代理公司: 天津市三利專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司12107
• 代理人: 李蕊

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及多肽類(lèi)產(chǎn)品生物技術(shù)生產(chǎn)領(lǐng)域，尤其是一種鷹嘴豆肽的制備方法。

背景技術(shù)

鷹嘴豆為豆科草本植物，因其種子形似鷹嘴而得名，目前在我國(guó)青海、新疆、陜西、甘肅等干旱地區(qū)均有種植。鷹嘴豆是一種天然的植物蛋白資源，所含營(yíng)養(yǎng)成分豐富，其中碳水化合物的含量占干基總量的55-60％，蛋白質(zhì)含量占干基總量的25-30％。鷹嘴豆還是一種很好的植物氨基酸補(bǔ)充劑，其蛋白中必需氨基酸的組成與聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織FAO的推薦值最為接近，因此具有較好的醫(yī)用保健價(jià)值，可作為兒童和中老年人營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑。除此之外，鷹嘴豆還可以作為藥材，在降血降糖、抗氧化和抗腫瘤等方面具有明顯功效。

鷹嘴豆肽是由特定的蛋白酶對(duì)鷹嘴豆蛋白水解而得到的一類(lèi)小分子多肽的混合物，這些短肽氨基酸的組成幾乎和鷹嘴豆蛋白保持一致，但比蛋白質(zhì)更容易被人體消化吸收和利用，而且其加工特性和生理活性更為優(yōu)越。由于鷹嘴豆表面有一層堅(jiān)韌的種皮，因此在蛋白酶水解之前需進(jìn)行脫皮、粉碎、有機(jī)溶劑脫脂等前處理(ZL 201110352393.9，ZL201310125440.5，201610367935.0)。上述前處理工藝較為繁瑣，在大規(guī)模生產(chǎn)中會(huì)造成額外的設(shè)備投資和人力消耗，同時(shí)有機(jī)溶劑的大量使用也會(huì)使生產(chǎn)過(guò)程存在安全隱患和嚴(yán)重的環(huán)境污染。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種高純度的鷹嘴豆肽的制備方法。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種鷹嘴豆肽的制備方法，將帶皮的鷹嘴豆浸泡后用蒸汽爆破預(yù)處理；使用堿溶酸沉方法獲得蛋白沉淀物；蛋白酶水解獲得小分子多肽溶液；膜分離純化和濃縮干燥獲得鷹嘴豆肽粉。

優(yōu)選的，上述鷹嘴豆肽的制備方法，具體步驟如下：

(1)稱(chēng)取帶皮的鷹嘴豆與水按照質(zhì)量比1:2(鷹嘴豆：水)混合后室溫浸泡8h；

(2)將步驟(1)中的鷹嘴豆直接用蒸汽爆破設(shè)備進(jìn)行預(yù)處理，蒸汽壓力為0.5～1.0MPa，維壓時(shí)間為5～10mi n，得到豆渣；

(3)將步驟(2)中的豆渣與水按照質(zhì)量比1:5混合，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至9～11，室溫?cái)嚢杼崛?h，提取完成后離心過(guò)濾，得到濾液；

(4)用鹽酸調(diào)節(jié)步驟(3)中濾液的pH為3～4，室溫靜置沉降2h，離心棄去上清液，得到蛋白沉淀物；

(5)將步驟(4)中獲得的蛋白沉淀物與水按照質(zhì)量比1:8～1:10混合后加入酶解罐中，設(shè)置酶解溫度50～60℃，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH 7～8，加入蛋白沉淀物質(zhì)量0.1％～0.5％的蛋白酶，200～400r/min酶解3～6h后離心，上清液即為小分子多肽溶液。

優(yōu)選的，上述鷹嘴豆肽的制備方法，所述步驟(5)中蛋白酶為食品級(jí)的堿性蛋白酶(酶活力≥2×10⁶U/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥8×10⁶U/g)或復(fù)合蛋白酶(酶活力≥3×10⁶U/g)。

優(yōu)選的，上述鷹嘴豆肽的制備方法，將所述步驟(5)中的小分子多肽溶液使用孔徑為0.2μm的微濾膜進(jìn)行過(guò)濾，透過(guò)液再經(jīng)截留相對(duì)分子質(zhì)量2000的超濾膜處理后，濃縮干燥制得鷹嘴豆肽粉。

優(yōu)選的，上述鷹嘴豆肽的制備方法，所述濃縮干燥中濃縮方法為真空濃縮，干燥方法為噴霧干燥或冷凍干燥。

上述鷹嘴豆肽的制備方法所得鷹嘴豆肽的檢測(cè)方法采用GB/T22492-2008附錄A中的肽相對(duì)分子質(zhì)量分布的測(cè)定法以及附錄B中的肽含量測(cè)定方法。

本發(fā)明的有益效果是：

上述鷹嘴豆肽的制備方法，使用蒸汽爆破技術(shù)直接對(duì)帶皮的鷹嘴豆進(jìn)行預(yù)處理，省去了傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝中脫皮、粉碎、有機(jī)溶劑脫脂等步驟；同時(shí)，蒸汽爆破處理后的鷹嘴豆的蛋白質(zhì)提取更加充分，更容易被蛋白酶水解，產(chǎn)品的收率和純度都得到了較好的提升；整個(gè)工藝操作簡(jiǎn)便，綠色環(huán)保，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的需要。

附圖說(shuō)明

圖1為工藝流程圖；

圖2為制得的鷹嘴豆肽的分子量分布圖。

具體實(shí)施方式

為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所述技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。

實(shí)施例1