[發(fā)明專利]一種降低革葉衛(wèi)矛組培污染率的培養(yǎng)基及其方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710150116.7
• 申請日: 2017-03-14
• 公開（公告）號: CN106797890B
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發(fā)明（設計）人: 張丹;張茂;郭冠男;孟偉芳;趙志汝;王東超
• 申請（專利權）人: 河南紅楓種苗股份有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01H4/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

1.一種降低革葉衛(wèi)矛組培污染率的誘導培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基為：含有0.7-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L NAA、50-80mg/L抱樸香桂精油、20~30g/L蔗糖和7~8g/L瓊脂的MS培養(yǎng)基， pH值為5.86~5.90。

2.根據權利要求1所述的誘導培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基為：含有1.0mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA 、50mg/L抱樸香桂精油、30g/L蔗糖和7g/L瓊脂的MS培養(yǎng)基， pH值為5.90。

3.一種利用權利要求1或2所述誘導培養(yǎng)基降低革葉衛(wèi)矛組培污染率的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：將革葉衛(wèi)矛外植體接種到權利要求1或2所述的培養(yǎng)基上，獲得組培苗；

步驟2：所述步驟1獲得的組培苗培養(yǎng)10~15d后，轉入含有0.8-1.0mg/L 6-BA 、0.1-0.3mg/L NAA、20~30g/L蔗糖和7~8g/L瓊脂的MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟1所述外植體接種之前還包括外植體消毒步驟，所述外植體消毒后再進行前處理步驟；

所述前處理具體為：取革葉衛(wèi)矛外植體→酒精浸泡30s→無菌水沖洗2次，每次2min→0.1%升汞浸泡8min→無菌水沖洗2次，每次2min→換杯→0.1%升汞浸泡8min→無菌水沖洗2次，每次2min→換杯→0.1%升汞浸泡8min→無菌水沖洗2min→換杯→無菌水沖洗3min→換杯→無菌水沖洗3min。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述消毒具體為：取外植體采用流水沖洗30-40min，再用0.1%次氯酸鈉浸泡10-15min。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟1中所述接種具體為：

初次接種前酒精燈上烤兩把鑷子一把刀，一把鑷子處理外植體，一把鑷子用來接種；接種前，事先在酒精燈上烤另一把鑷子和刀，放置在培養(yǎng)皿上備用，待此盤接種完畢，再烤一把鑷子放置于培養(yǎng)皿上備用，并用事先高溫消毒的一把鑷子和刀處理下一盤外植體，以此類推，直到接種完畢。

7.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述革葉衛(wèi)矛外植體為帶腋芽的莖段、葉片或葉柄。

8.根據權利要求3至7任一項所述的方法，其特征在于，所述革葉衛(wèi)矛組織培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為24~26℃，光照時間為12~18h/d，光照強度為2000~2500lx，相對濕度為 45%~50%。

9.根據權利要求3至7任一項所述的方法，所述革葉衛(wèi)矛組織培養(yǎng)的過程中還包括組培室滅菌步驟，所述組培室滅菌具體為：每天早上或者晚上開紫外燈殺菌30min，每周打開臭氧發(fā)生器，殺菌15min。