[發(fā)明專利]一種提高雙鏈DNA穩(wěn)定性的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710147666.3
• 申請日: 2017-03-13
• 公開（公告）號: CN106834278B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 向紅先
• 申請（專利權(quán)）人: 上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 馬云華

本發(fā)明提供一種提高雙鏈DNA穩(wěn)定性的方法，其包括步驟：將雙鏈DNA保存于穩(wěn)定劑中，所述穩(wěn)定劑由如下組分組成：聚乙酰亞胺納米粒，其粒徑為20~200 nm，分子量1800；殼聚糖納米粒，其粒徑為20~200 nm，分子量7~8 KDa，脫乙酰度70~75%；氧化石墨烯；所述穩(wěn)定劑的溶液為水；其中，聚乙酰亞胺納米粒、殼聚糖納米粒和氧化石墨烯的濃度分別為0.02~0.08 mg/ml、0.02~0.08 mg/ml和0.05~0.06μg/ml。本發(fā)明可以使得雙鏈DNA在高濃度的內(nèi)切酶情況下保持高度的穩(wěn)定性，使得雙鏈DNA可以在更為復(fù)雜的環(huán)境下保存，利于相關(guān)科研工作和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提高雙鏈DNA穩(wěn)定性的方法。

背景技術(shù)

雙鏈DNA由于容易在體外受到損壞，而其又是科研活動中非常重要的載體，使得如何避免其受到損壞而保持穩(wěn)定性成為重要的研究課題。

近幾年，利用氧化石墨烯作為雙鏈DNA穩(wěn)定劑受到了研究者的普遍關(guān)注，如《Nanoscale》刊載的“Adsorption of double-stranded DNA to graphene oxidepreventing enzymatic digestion”和《Small》刊載的“Constraint of DNA onFunctionalized Graphene Improves its Biostability and Specificity”均有所報(bào)道。

然而，上述方法所能提供的穩(wěn)定性還是有限的，如在高濃度內(nèi)切酶的情況下如何保持高度的穩(wěn)定性，現(xiàn)有的研究成果還沒有涉及。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的研究空白和缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種提高雙鏈DNA穩(wěn)定性的方法，該方法包括步驟：

將雙鏈DNA保存于穩(wěn)定劑中，所述穩(wěn)定劑由如下組分組成：

聚乙酰亞胺納米粒，其粒徑為20~200 nm，分子量1800；

殼聚糖納米粒，其粒徑為20~200 nm，分子量7~8 KDa，脫乙酰度70~75%；

氧化石墨烯；

所述穩(wěn)定劑的溶液為水；

其中，聚乙酰亞胺納米粒、殼聚糖納米粒和氧化石墨烯的濃度分別為0.02~0.08mg/ml、0.02~0.08 mg/ml和0.05~0.06μg/ml。

優(yōu)選的，所述聚乙酰亞胺納米粒的粒徑為150~180 nm。

優(yōu)選的，所述殼聚糖納米粒的粒徑為150~180 nm。

優(yōu)選的，所述聚乙酰亞胺納米粒的濃度為0.03 mg/ml。

優(yōu)選的，所述殼聚糖納米粒的濃度為0.03 mg/ml。

優(yōu)選的，所述氧化石墨烯的濃度為0.055μg/ml。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明可以使得雙鏈DNA在高濃度的內(nèi)切酶情況下保持高度的穩(wěn)定性，使得雙鏈DNA可以在更為復(fù)雜的環(huán)境下保存，利于相關(guān)科研工作和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

附圖說明

圖1為本發(fā)明瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果圖，泳道1為實(shí)施例1穩(wěn)定劑對DNA保護(hù)結(jié)果，泳道2為實(shí)施例2穩(wěn)定劑對DNA保護(hù)結(jié)果，泳道3為實(shí)施例3穩(wěn)定劑對DNA保護(hù)結(jié)果，泳道4為對比實(shí)施例1穩(wěn)定劑對DNA保護(hù)結(jié)果，泳道5為對比實(shí)施例2穩(wěn)定劑對DNA保護(hù)結(jié)果，泳道6為對比實(shí)施例3穩(wěn)定劑對DNA保護(hù)結(jié)果。

具體實(shí)施方式