[發明專利]一種苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201710147110.4
• 申請日: 2017-03-13
• 公開（公告）號: CN106879466B
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 梁鈞淞;楊業容;莫昭展;韋敏
• 申請（專利權）人: 玉林師范學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 王洪娟

本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法，包括依次進行的如下步驟：獲取青莢葉的外植體、不定芽誘導、不定芽的繼代培養、不定芽的生根培養、試管苗移栽；所述的不定芽誘導的誘導培養基包括：MS培養基、0.5～1.0mg/L ZT、0.1～0.3mg/L NAA、25～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L瓊脂、0.5～1.0g/L活性炭，pH為5.4～5.8，本發明的方法的苗族藥材青莢葉試管苗移栽成活率達到91％以上。

技術領域

本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法。

背景技術

苗族藥材槍墻葉即青莢葉(Helwingia japonica.japonica)，為山茱萸科青莢葉屬落葉灌木。青莢葉屬有青莢葉、中華青莢葉、西藏青莢葉、浙江青莢葉和峨眉青莢葉等5種，主要分布于亞洲東部的尼泊爾、錫金、不丹、印度北部、緬甸北部、越南北部、中國和日本等國。我國5種均產，主要分布于陜西、河南、長江流域及華南地區等海拔1500米以上的原始森林中。由于青莢葉雌花無梗，花和果實在葉面中央的主脈上生長，又被稱為葉上花或葉上果。其根莖葉入藥，具有舒筋活絡、調經、止咳等功效，苗族民間常以葉上花、無花果、月季花搭配治療月經不調,以葉上花、矮陀陀、土三七搭配治療勞傷,單獨使用青莢葉來治療年久咳喘。此外，青莢葉為落葉小灌木，雌雄異株，雌株的花和雄株的果均具有很強的直觀性，這種奇特的現象總能吸引路人的駐足觀賞。景觀配置上，種植在陰濕肥沃處，如配植紫丁香、垂絲海棠樹下，或種植于水塘、墻邊或臺階前，或盆栽于室內，均有良好的觀賞效果。

目前，青莢葉尚處于引種階段，少量栽培于貴州、廣西苗族地區。青莢葉主要采用種子繁殖，但由于其種子常被鳥類采食，難以獲得足夠用于繁殖的種子。因此，為了解決青莢葉規模化種植中其種苗缺乏的問題，有必要建立青莢葉的組織培養快繁體系，本發明選擇青莢葉帶節莖段為外植體，經不定芽誘導培養、繼代培養、生根培養以及移栽等步驟，實現了苗族藥材青莢葉的快速繁殖。本發明具成本低、工藝簡單、成苗快等特點，可直接用于青莢葉種苗的工廠化生產，對于青莢葉的遺傳改良和種質資源保護具有重要的現實意義。

目前，國內外尚未有青莢葉組織培養技術的報道，也未有青莢葉組培快繁專利的申請。

發明內容

本發明的目的是提供一種苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法，本發明選擇青莢葉帶節莖段為外植體，經不定芽誘導培養、繼代培養、生根培養以及移栽等步驟，實現了苗族藥材青莢葉的快速繁殖，從而實現了本發明的目的。

本發明提供的技術方案為：一種苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法，包括依次進行的如下步驟：獲取青莢葉的外植體、不定芽誘導、不定芽的繼代培養、不定芽的生根培養、試管苗移栽；

所述的不定芽誘導的誘導培養基包括：MS培養基、0.5～1.0mg/L ZT、0.1～0.3mg/L NAA、25～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L瓊脂、0.5～1.0g/L活性炭，pH為5.4～5.8。

在上述的苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法中，所述的不定芽誘導的方法為：將青莢葉的外植體經清洗消毒處理后切成1.0～1.5cm左右的帶節莖段并接種到誘導培養基中，在25～28℃進行全暗培養25～30天即可誘導形成不定芽。

在上述的苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法中，不定芽的繼代培養所用的繼代培養基包括：MS培養基、0.5～1.0mg/L 6-BA、0.1～0.5mg/L NAA、20～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L瓊脂、0.1～0.5g/L活性炭，pH為5.4～5.8。

在上述的苗族藥材青莢葉的快速繁殖方法中，所述的不定芽的繼代培養的方法具體為：將經過不定芽誘導得到的不定芽切成長約1～2cm的莖段并接種到繼代培養基中培養25～30天即可實現不定芽的繼代。