[發明專利]一種具有抗腦缺血作用的多肽及其應用

在審

• 申請號: 201710145199.0
• 申請日: 2017-03-13
• 公開（公告）號: CN106916210A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發明（設計）人: 孫勇軍;程曉昆;高子彬
• 申請（專利權）人: 河北科技大學
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;A61K38/16;A61P9/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于腦血管病的藥物技術領域，本發明涉及一種具有抗腦缺血作用的多肽及其應用。

背景技術

腦缺血是一種死亡率高、致殘率高的常見病、多發病。迄今為止，唯一有效的治療方法就是溶栓療法，但此療法不僅有效率低，而且必須得在腦缺血發生后的短時間內給藥才有效。因此，進一步研究腦缺血損傷的分子機制，發現新靶點，研制抗腦缺血新藥意義重大。

N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體是一個重要的抗腦缺血靶點，研究人員已開發了多種NMDA受體拮抗劑，但由于療效不確切或不良反應嚴重而被停用。近年來，研究人員將重點聚焦于NMDA受體亞型的研究。研究發現，腦缺血時，含GluN2A的NMDA受體主要介導促存活作用，而含GluN2B的NMDA受體則主要介導促死亡作用。因此，選擇性地阻斷GluN2B或激活GluN2A都可對抗腦缺血損傷。目前，主要基于GluN2B設計治療策略，共有3條途徑：選擇性GluN2B拮抗劑、GluN2B/PSD-95解偶聯劑和GluN2B/DAPK1解偶聯劑。

雖然通過上述三種方法選擇性阻斷GluN2B介導的促死亡信號都可對抗腦缺血損傷，但把著眼點放在比NMDA受體更下游的促死亡信號分子上，可能會進一步提高選擇性，減小由藥物引起的精神異常、運動功能惡化、幻覺等副作用。神經元型一氧化氮合酶（nNOS）是NMDA受體下游的促死亡信號分子，腦缺血后，由NMDA受體所介導的nNOS過度激活是神經元損傷的重要原因，但通過直接抑制nNOS活性來治療腦缺血會嚴重損傷動物的學習記憶功能。2010年，《Nature Medicine》上刊登了 Zhou L等的研究論文，他們根據PSD-95與nNOS結合的構效關系，設計合成了小分子化合物ZL006，該化合物可通過抑制nNOS與PSD-95的結合來有效對抗腦缺血損傷。神經元型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配體（CAPON）是體內nNOS的特異性配體，腦缺血時可通過特異性介導nNOS-CAPON-p38MAPK信號，引起神經元興奮性毒性損傷，通過干擾CAPON的功能可有效治療缺血損傷。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有抗腦缺血作用的多肽及其應用，其特征在于所述多肽具有的肽鏈片段序列為：YGRKKRRQRRRQELGDSLDDEIAV。

本發明提供的多肽可以高速高效地進入細胞，可顯著抑制谷氨酸誘導的皮層神經元興奮性毒性損傷，也可明顯降低MCAO模型大鼠的神經行為評分和相對腦梗死面積。由上述結果可知，無論是對體外神經元，還是對腦缺血模型大鼠，該多肽均表現出良好的治療作用，可以用于治療缺血性腦血管病或腦梗塞。該多肽的作用機制為干擾CAPON的功能，拮抗nNOS下游信號轉導。

本發明提供的多肽具有較好的穿越血腦屏障作用，可以按常規藥劑學制備成粉針劑注射給藥。

本發明提供的多肽具有在制備治療缺血性腦血管疾病藥物中良好的應用前景。

附圖說明

圖1：YV-24對Glu興奮性毒性損傷的影響（n=6）

注：*P＜0.05與Glu組相比；YV-24為Tat-CAPON13C；YA-24為Tat-CAPON13C?AA。

結論：0.5和2 μmol/L的多肽產生顯著的抑制谷氨酸興奮性毒性損傷作用。

圖2：各組動物的神經評分情況（n=6）

注：* P＜0.05與溶劑組相比。

結論：多肽給藥組的神經評分明顯比溶劑組低，并且具有統計學意義。這表明，該多肽可抑制腦缺血損傷造成的神經行為障礙。

圖3：各組動物的死亡情況（n=12）

結論：假手術組沒有死亡，溶劑組和給藥組的死亡數分別為4和3（每組共12只動物），給藥組動物死亡數低于溶劑組。

圖4：各組動物的相對梗死面積（n=6）

注：* P＜0.05與溶劑組相比。

結論：給藥組的相對梗死面積明顯小于溶劑組，并具有顯著差異。這表明，該多肽可有效對抗腦缺血導致的腦組織梗死。

圖5：多肽的作用機制圖

具體實施方式

以下結合具體實施例對上述方案做進一步說明。應理解，這些實施例是用于說明本發明而不限于限制本發明的范圍。

實施例1.多肽（YGRKKRRQRRRQELGDSLDDEIAV）的制備