[發明專利]雞新城疫、減蛋綜合征二聯基因工程亞單位疫苗的制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710141910.5
• 申請日: 2017-03-10
• 公開（公告）號: CN108567976A
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發明（設計）人: 李生偉;付偉;張晟;代燕平;王雯茜;何剛;程琳;高小平
• 申請（專利權）人: 成都貝愛特生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/17;A61K39/235;C12N15/85;C12N15/62;A61P31/14;A61P31/20
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1.一種雞新城疫和減蛋綜合征病毒二聯基因工程亞單位疫苗，其特征在于，所述的二聯基因工程亞單位疫苗由雞新城疫病毒HN片段與減蛋綜合征病毒knob片段經連接肽融合組成。

2.權利要求1所述的雞新城疫和減蛋綜合征病毒二聯基因工程亞單位疫苗，其特征在于，所述的雞新城疫病毒包含如SEQ ID NO：1所示的HN部分的氨基酸序列，或由在所述HN氨基酸序列中的任何一個或幾個氨基酸被刪除，添加和/或取代的氨基酸序列；所述的減蛋綜合征病毒包含如SEQ ID NO：3所示的knob氨基酸序列，或由在所述knob氨基酸序列中的任何一個或幾個氨基酸被刪除，添加和/或取代的氨基酸序列。

3.權利要求1所述的雞新城疫病毒和減蛋綜合征病毒二聯基因亞單位疫苗，其特征在于，所述的雞新城疫病毒HN部分包含如SEQ ID NO：2所示的的核苷酸序列；所述的減蛋綜合征病毒knob包含如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列。

4.一種真核表達載體，其包含權利要求3所述的雞新城疫病毒HN和減蛋綜合征病毒knob的核苷酸序列(SEQ ID NO：2，4)。

5.權利要求1所述的雞新城疫和減蛋綜合征病毒二聯基因亞單位疫苗的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)通過全基因合成獲得雞新城疫病毒HN部分基因和減蛋綜合征knob基因融合片段；

(2)將基因插入真核表達載體BP0001，構建重組載體質粒；

(3)將重組質粒轉染哺乳動物細胞，表達所述的雞新城疫和減蛋綜合征病毒二聯基因亞單位疫苗；

(4)從細胞培養上清中收獲目的蛋白，經純化獲得亞單位疫苗。

6.一種用于預防雞新城疫和減蛋綜合征的疫苗組合物，所述的疫苗組合物包含權利要求5(4)所述的純化獲得的亞單位疫苗和免疫佐劑，或其它提高免疫原性的疫苗用載體。

7.權利要求6所述的疫苗組合物，其可通過靜脈注射、肌肉注射、腹膜注射以及噴霧或氣霧等方式施用。

8.權利要求1所述的雞新城疫和減蛋綜合征病毒二聯基因亞單位疫苗在制備預防禽類如雞新城疫和減蛋綜合征疫苗的用途。