[發明專利]一種細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法

有效

• 申請號: 201710139629.8
• 申請日: 2017-03-09
• 公開（公告）號: CN106932371B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 王衛;董穎杰;丁彩鳳;萬均;羅細亮
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 青島中天匯智知識產權代理有限公司 37241
• 代理人: 郝團代

1.一種細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法，其特征在于：該方法采用了一種基于可控釋放的熒光傳感器；所述的熒光傳感器包括谷胱甘肽識別探針、熒光染料和金納米籠；所述的谷胱甘肽識別探針是含有雙硫鍵的核苷酸；所述的谷胱甘肽識別探針的堿基序列為5’-ACGAGT CA S-S TTT TGT TTG TTC CCC CCT TCT TTC TTA-3’。

2.一種如權利要求1所述的細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法，其特征在于：所述的谷胱甘肽識別探針是通過靜電作用被組裝到金納米籠表面。

3.一種如權利要求1所述的細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法，其特征在于：所述的谷胱甘肽識別探針是通過采用正電荷修飾劑被組裝到金納米籠表面。

4.一種如權利要求1所述的細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法，其特征在于：所述的谷胱甘肽識別探針是通過采用聚二烯丙基二甲基氯化銨被組裝到金納米籠表面。

5.一種如權利要求1所述的細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法，其特征在于：所述的熒光染料是羅丹明B。

6.一種如權利要求1所述的細胞內谷胱甘肽的熒光成像方法，其特征在于步驟如下：

(1)取適量細胞懸浮液，離心分離，移除上清液；

(2)加入稀釋后的所述的熒光傳感器進行孵育，10-50min后進行激光共聚焦掃描成像；

其中，所述的熒光傳感器的制備方法，步驟如下：

(1)在金納米籠中加入聚二烯丙基二甲基氯化銨溶液，37℃恒溫振蕩12h；

(2)在上述溶液中加入熒光染料溶液，37℃恒溫振蕩12h后加入谷胱甘肽識別探針溶液，37℃振蕩12h，離心分離，清洗，即制得GSH熒光傳感器；

其中，所述的熒光染料是羅丹明B；所述的谷胱甘肽識別探針是含有雙硫鍵的核苷酸分子，其堿基序列為5’-ACG AGT CA S-S TTT TGT TTG TTC CCC CCT TCT TTC TTA-3’。