[發(fā)明專(zhuān)利]四型膠原作為靶點(diǎn)在早期診斷主動(dòng)脈瘤/夾層中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710137438.8
• 申請(qǐng)日: 2017-03-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106986920A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜杰;徐福建;李玉琳;徐恪;許晨
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京市心肺血管疾病研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C07K7/06
• 分類(lèi)號(hào): C07K7/06;A61K31/352;A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 北京市誠(chéng)輝律師事務(wù)所11430
• 代理人: 郎堅(jiān)

1.四型膠原(COLIV)作為診斷檢測(cè)靶標(biāo)，在研發(fā)/篩選主動(dòng)脈夾層/瘤早期診斷標(biāo)識(shí)物中的應(yīng)用。

2.一段特異性靶向四型膠原的多肽或其衍生物，其特征在于，

所述的多肽的序列如SEQ ID NO.1所示；

所述的衍生物為靶向四型膠原的多肽被熒光標(biāo)識(shí)物，MRI標(biāo)識(shí)物或其他可用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的標(biāo)記物或電信號(hào)檢測(cè)的標(biāo)記物中的一種或多種修飾/絡(luò)合/共價(jià)偶聯(lián)后的產(chǎn)物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的靶向四型膠原的多肽的衍生物，其特征在于，

所述靶向四型膠原的多肽的衍生物具體為

(1)所述的靶向四型膠原的多肽被羅丹明B通過(guò)共價(jià)鍵修飾得到的COLIV-RhB，其結(jié)構(gòu)如式1所示：

(2)所述的靶向四型膠原的多肽被兩分子的1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,,4,7,10-四羧酸釓?fù)ㄟ^(guò)酰胺鍵偶聯(lián)得到的COLIV-Gb，其結(jié)構(gòu)如式2所示：

或(3)所述的靶向四型膠原的多肽被羅丹明B通過(guò)共價(jià)鍵修飾后，進(jìn)一步被兩分子的1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,,4,7,10-四羧酸釓?fù)ㄟ^(guò)酰胺鍵偶聯(lián)的產(chǎn)物(CollagenIV-targeted contrast agent,C4TCA)，其結(jié)構(gòu)如式3所示

4.編碼權(quán)利要求2所述的靶向四型膠原的多肽的核苷酸片段。

5.權(quán)利要求2或3所述靶向四型膠原的多肽(COLIV-peptide)或其衍生物在制備主動(dòng)脈夾層/瘤早期診斷標(biāo)志物中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述的診斷包括但不限于，經(jīng)超聲下檢測(cè)、經(jīng)MRI下檢測(cè)、經(jīng)CTA下檢測(cè)、經(jīng)熒光成像下檢測(cè)中的任意一種或幾種。

7.權(quán)利要求2所述靶向四型膠原的多肽(COLIV-peptide)或其衍生物在制備治療或預(yù)防主動(dòng)脈夾層/瘤藥物中的應(yīng)用，所述的藥物包括但不限于，經(jīng)胃腸消化道道給藥的藥物、經(jīng)靜脈注射給藥的藥物、經(jīng)皮下包埋給藥方式給藥的藥物。

8.權(quán)利要求3所述的C4TCA的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)充分鹽化N-羥基琥珀酰亞胺活化過(guò)的1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四羧酸(NHS-DOTA，化合物1)的羧基；

(2)使用N-羥基琥珀酰亞胺修飾過(guò)的1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,,4,7,10-四羧酸(NHS-DOTA，化合物1)和六水合氯化釓絡(luò)合，獲得用N-羥基琥珀酰亞胺修飾過(guò)的1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,,4,7,10-四羧酸釓(NHS-DOTA-Gd，化合物2)；

(2)使用COLIV-RhB(化合物3)和NHS-DOTA-Gd反應(yīng)，獲得C4TCA(化合物4)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的合成步驟為：

(1)取12.7mg的N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活化過(guò)的1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四羧酸(DOTA)，即NHS-DOTA，溶解于1ml的去離子水中，向其中加入8mg的碳酸氫鈉，室溫磁力攪拌10-20分鐘，使其羧基充分鹽化；

(2)取9.4mg的六水合氯化釓溶解于200μL的去離子水中，將所得的溶液緩慢的滴加入實(shí)例4(1)的溶液中，室溫磁力攪拌12小時(shí)，使其充分絡(luò)合；

(3)取20mg的羅丹明b修飾的四型膠原的靶向多肽(RhB-COLIV)在避光的環(huán)境下溶解于800μL的水中，將所得的溶液加入實(shí)例4(2)最終得到的溶液里，避光環(huán)境下室溫磁力攪拌12小時(shí)，所得的混合液通過(guò)1000MW的透析膜超濾提純，最終溶液通過(guò)凍干的方式得到紅色絮狀固體，所有的后處理全程避光。