[發(fā)明專利]一種胰激肽原酶及其制備工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710131920.0
• 申請日: 2017-03-07
• 公開（公告）號: CN107043760B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設計）人: 倪來學;凌峰;劉學生
• 申請（專利權(quán)）人: 臨沂新程金鑼肉制品集團有限公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 許靜

本發(fā)明涉及一種胰激肽原酶及其制備工藝，胰激肽原酶的制備步驟為：凍豬胰臟解凍、絞碎、磨制、預處理、纖維分離、活化、活化胰漿過濾、醇沉、重相壓濾、制粒等19個步驟，最終獲得胰激肽原酶。本發(fā)明實現(xiàn)了胰臟中胰激肽原酶和彈性蛋白酶充分激活，為胰激肽原酶及胰彈性蛋白酶進一步聯(lián)產(chǎn)創(chuàng)造可能性；本發(fā)明中所得胰激肽原酶中胰彈性酶活力非常高；本發(fā)明極大提高了過濾速度，實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)；本發(fā)明采用沸騰干燥方式，投資小、耗時短、活力損耗小。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種胰激肽原酶及其制備工藝，屬于胰激肽原酶的制備技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

胰激肽原酶又稱胰激肽釋放酶、血管舒緩素，其普遍存在于人體的胰臟、頜下腺與唾液中，其中以胰臟中含量最高。現(xiàn)有技術(shù)中，胰激肽原酶是從豬胰腺中提取的蛋白水解酶類，由18中氨基酸和4種糖所組成，為一種內(nèi)切蛋白水解酶類，分子量為26800，在生物體內(nèi)，該酶是以酶原，即激肽釋放酶原形式存在的。

目前市場上胰激肽原酶基本都是從胰臟中直接提取的。先把胰臟絞碎，再用醋酸緩沖液把胰激肽原酶從胰臟中提取出來。新鮮胰臟必須先去除脂肪和結(jié)締組織，經(jīng)過機械破碎，再用有機溶劑除去大部分脂溶性雜質(zhì)后才能用水提取。對于冰凍的胰臟，還要經(jīng)過刨切機將胰臟刨切成片狀或絲狀，然后再進行搗碎、研磨、勻漿等操作；其次是胰臟中的酶均是以無活性的酶原形式存在，還需采用多種活化劑在適當條件下對其活化。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種胰激肽原酶及其制備工藝，本發(fā)明首先把胰臟中胰激肽原酶激活，再從中分離出來，解決了現(xiàn)有技術(shù)中胰激肽原酶不能規(guī)模化生產(chǎn)中的難題。本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種胰激肽原酶的制備工藝，具體步驟如下：

(1)凍豬胰臟解凍

凍豬胰臟在無菌的解凍間解凍架上解凍至半化狀態(tài)，保證胰臟中心溫度≤0℃，解凍間溫度為15-20℃，空氣相對濕度≥80％RH；

解凍間用臭氧進行消毒、解凍架等工器具用熱堿水或二氧化氯消毒液消毒。

原料在轉(zhuǎn)運過程中應避免污染，不得接觸地面等污染源(托盤等工器具應事先消毒)。

(2)絞碎

將解凍后的豬胰臟在切絞一體機中進行切絞，切絞過程豬胰臟漿的溫度≤10℃。

切絞一體機的消毒：采用熱堿水或二氧化氯消毒液對切絞一體機進行消毒。

(3)磨制

將絞碎的豬胰臟漿置于無菌的磨機中，進行磨漿，經(jīng)兩臺串聯(lián)膠體磨機研磨兩遍后送入1號提取罐，邊攪拌邊加入胰臟活化液、碳酸氫鈉和乳酸，轉(zhuǎn)速為30HZ；胰臟活化液、碳酸氫鈉、乳酸的終濃度(質(zhì)量濃度)分別為5-10％、0.01％和0.05％；

優(yōu)選的，胰臟活化液、碳酸氫鈉、乳酸的終濃度(質(zhì)量濃度)分別為8.5％、0.01％和0.05％。

使用完畢的磨機清洗消毒。先用清水(或結(jié)合毛刷等工具)清洗干凈，再用熱堿水消毒10min以上，最后用熱水(85℃)沖洗干凈。

(4)預處理

物料在1號提取罐中攪拌5min后，緩慢升溫5小時，使物料溫度升至36-48℃，升溫過程中間隙攪拌，每小時攪拌一次，每次15min；

優(yōu)選的，1號提取罐中，攪拌5min后，緩慢升溫5小時，使物料溫度升至40℃。

(5)纖維分離

將預處理后的物料通過除漿機分離纖維，獲得纖維組織和漿液，漿液中不含纖維，然后將漿液打入2號提取罐；

(6)活化