[發明專利]基于代謝組學研究手段進行葡萄酒產地識別的方法

在審

• 申請號: 201710127620.5
• 申請日: 2017-03-06
• 公開（公告）號: CN106770875A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 顧小紅;王怡淼;王利平;胡博;張慧;趙建新
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司23211
• 代理人: 張勇

1.一種對不同產地的葡萄酒進行檢測的方法，其特征在于，所述方法是先選擇若干個不同產地的葡萄酒樣品，對其揮發性物質的種類進行檢測并計算相對含量，然后采用主成分分析(PCA)和/或正交信號校正偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)分析每個樣品中不同物質的相對含量，建立PCA模型和/或OPLS-DA模型或者進一步獲知不同產地的葡萄酒樣品的差異代謝物；當需要檢測某一來自上述產地的未知葡萄酒樣品時，能夠采用方案A或者方案B獲知其產地信息；

其中方案A具體是：先對這一未知葡萄酒樣品的揮發性物質的種類進行檢測并計算相對含量，然后將數據導入到PCA和/或OPLS-DA模型中，即可獲知這一未知葡萄酒樣品的產地信息；方案B具體是：檢測一個以上的差異代謝物在這一未知葡萄酒樣品中的存在情況，根據差異代謝物的存在情況獲知產地信息。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述進一步獲知不同產地的葡萄酒樣品的差異代謝物，具體是將OPLS-DA模型中VIP(Variable Iportance in the Projection)值大于1的主成分進行ANOVA檢驗，結合P值判斷差異性表達代謝物，P＜0.05為差異有統計學意義，獲得若干個差異代謝物。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述差異代謝物的存在情況包括存在與否，或者所存在的相對含量。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述產地是法國、智利、西班牙和/或澳大利亞。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)對樣品進行前處理，使用固相微萃取技術吸附葡萄酒中的揮發性物質，將溫度恒定在45℃萃取30min；

(2)利用氣相色譜—質譜聯用技術測定葡萄酒的揮發性組分，得到重構總離子流圖；

(3)將色譜圖上分離出的峰所對應物質的質譜信息通過NIST2014，WILEY8.0譜庫檢索分析，對峰面積進行手動積分，使用半定量法將峰面積與內標2-辛醇峰面積的比值來表示每個物質的相對含量；

(4)數據導入SIMCA13.0中，建立PCA和/或OPLS-DA模型；或者進一步將OPLS-DA模型中VIP值大于1的代謝物進行ANOVA檢驗，根據P值找出差異性代謝物。

6.一種從產地法國、智利、西班牙、澳大利亞的葡萄酒中區分西班牙產葡萄酒的方法，其特征在于，所述方法是檢測來自法國、智利、西班牙、澳大利亞的若干個葡萄酒樣品中的2-Methyl-1-Propanol，2-Methyl-1-Propanol-Benzoic和/或Acetic Acid的相對含量，相對含量最低的樣品即為產地西班牙的葡萄酒。

7.一種從產地法國、智利、西班牙、澳大利亞的葡萄酒中區分澳大利亞產葡萄酒的方法，其特征在于，所述方法是檢測來自法國、智利、西班牙、澳大利亞的若干個葡萄酒樣品中的1,3-Dimethoxy-Benzene，如果樣品中不含有1,3-Dimethoxy-Benzene則該葡萄酒為澳大利亞產葡萄酒。

8.一種從法國、智利、西班牙、澳大利亞葡萄酒中區分智利產葡萄酒的方法，其特征在于，所述方法是檢測來自法國、智利、西班牙、澳大利亞的若干個葡萄酒樣品中的4-ethyl-2-methoxy-Phenol，如果樣品中不含有4-ethyl-2-methoxy-Phenol則該葡萄酒為智利產葡萄酒。

9.一種從法國、智利、西班牙、澳大利亞葡萄酒中區分葡萄酒產地的方法，其特征在于，所述方法是檢測來自法國、智利、西班牙、澳大利亞的若干個葡萄酒樣品中的1,3-Dimethoxy-Benzene，2-Methyl-1-Propanol，2-Methyl-1-Propanol-Benzoic，Acetic Acid和/或4-ethyl-2-methoxy-Phenol的存在與否或者相對含量；如果樣品中不含有1,3-Dimethoxy-Benzene則該葡萄酒為澳大利亞產葡萄酒；如果樣品中不含有4-ethyl-2-methoxy-Phenol則該葡萄酒為智利產葡萄酒；如果2-Methyl-1-Propanol，2-Methyl-1-Propanol-Benzoic和/或Acetic Acid的相對含量最低即則該葡萄酒為產地西班牙的葡萄酒。