[發明專利]一種包含牦牛骨小分子肽的深度養發素及其制備方法

有效

• 申請號: 201710123361.9
• 申請日: 2017-03-03
• 公開（公告）號: CN106798656B
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發明（設計）人: 王書敏
• 申請（專利權）人: 王書敏
• 主分類號: A61K8/65
• 分類號: A61K8/65;A61K8/98;A61K8/9789;A61K8/9794;A61K8/41;A61K8/44;A61Q5/12;C12P21/06;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/14
• 代理公司: 北京律遠專利代理事務所(普通合伙) 11574
• 代理人: 王冠宇

1.一種包含牦牛骨小分子肽的深度養發素的制備方法，其特征在于：其配方由以下成分組成：表面活性劑15.0-30.0％，牦牛骨小分子肽1.0-15.0％，增稠劑0.01-2.0％，防腐劑0.01-0.5％，保濕劑0.05-2.0％，植物提取物1.0-20.0％，香精0.1-3.0％，其余為去離子水；

所述牦牛骨小分子肽是以牦牛骨膠原蛋白為原料加工而成，其中分子量小于1000道爾頓以下的小肽質量分數為85％左右；

所述表面活性劑為下式（I）所示的季銨鹽型表面活性劑：

式（I）

R¹和R²彼此獨立地為具有12-26個碳原子以及1或2個雙鍵的脂基；

所述方法包括以下步驟：

(1)稱取配方中的去離子水，加熱至90-95℃，攪拌條件下加入表面活性劑，攪拌至完全溶解；

(2)再依次加入牦牛骨小分子肽、植物提取物、防腐劑、增稠劑、保濕劑、香精；

(3)攪拌均勻后，用pH調節劑調至洗發水的pH值為6.0-7.0，陳化20小時；

以及，其中所述牦牛骨小分子肽通過以下方法制得：

(1)將剔除表面附著的肉、筋、膜、軟骨的牦牛骨晾干，然后粉碎，過30目篩，得 到牦牛骨粉；

(2)按照牦牛骨粉重量加入為其5-10倍重量的脫脂液A，該脫脂液A為氯仿∶甲醇∶ 丙酮＝(2.0-3.0)∶(3.0-6.0)∶(0.5-1.0)體積比的混合物，然后在0-4℃下攪拌脫脂 16-48h，然后過濾掉脫脂液A，將牦牛骨粉加入到含有表面活性劑的乙醇：水混合液即脫脂液B中，脫脂液B中所述表面活性劑的濃度為0.01-0.1mol/L，在5-10 ℃下攪拌脫脂4-10h；

(3)在步驟(2)完成后，過濾掉脫脂液B，然后加入為牦牛骨粉10-15倍重量的0.1mol/L的鹽酸溶液，該鹽酸溶液含有0.2-0.5mol/L EDTA，在5-10℃攪拌16-32h，除去鹽酸溶液，按照每g牦牛骨加入10-15ml的4mol/L鹽酸嗎啉胍，于5-10℃攪拌8-24h，離心分離，沉淀用Tris-HCl的pH7.4緩沖液和0.5-1.0moL/L乙酸溶液充分洗滌后，用每g牦牛骨加入5-20ml的胃蛋白酶消化液和1-10ml中性蛋白酶消化液的混合液進行混懸，2-4℃下攪拌12-36h，離心分離，收集上清液；

(4)將所述上清液用3.0-5.0mol/LNaOH調節至pH為約7.5，加入NaCl使其濃度為2.0mol/L，4℃鹽析過夜，離心得到上清液Q1和沉淀P1；上清液Q1繼續加入NaCl調NaCl 濃度至4.0mol/L.4℃鹽析過夜，離心得到上清液Q2和沉淀P2；將沉淀P1和P2合并， 然后用0.1-0.3moL/L乙酸溶解，再用1.0-2.0moL/L NaOH中和至pH7.5，再用pH為7.4的0.005moL/LTris-HCl、蒸餾水進行透析平衡后，即得小分子肽初提液E1；

(5)將小分子肽初提液E1和3倍體積的Tris-HCl的pH 7.4的緩沖液混合后，置于燒杯中，加入用該緩沖溶液平衡后的陰離子交換劑，樹脂和小分子肽初提 液E1的體積比約為1∶5-1∶10，混合均勻，緩慢攪拌60-120min后，離心分離，收集上清液； 在上清液中加入氯化鈉使氯化鈉濃度為2.0mol/L，4℃鹽析過夜，離心30min，收集沉淀，將該沉淀用0.1-0.3moL/L乙酸溶解，再分別再用0.05mol/L乙酸、0.01mol/L乙酸、蒸餾水 依次進行透析平衡后，得小分子肽溶液，冷凍干燥，得到小分子肽蛋白凍干粉；

步驟（2）中的表面活性劑為下式（II）所示的甜菜堿型兩性離子：

式（II）。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：其組成按重量比包括：表面活性劑6.0-20.0％、牦牛骨小分子肽6.0-10.0％、增稠劑0.1-2.0％、防腐劑0.1-0.5％、保濕劑0.5-2.0％、植物提取物4.0-14.0％、香精0.5-3.0％和余量的水。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述增稠劑為羥乙基纖維素、鯨蠟硬脂醇類共聚物中的一種或幾種。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述防腐劑為聚季銨鹽-10、甲基氯異噻唑啉酮、甲基異噻唑啉酮中的一種或幾種。