[發(fā)明專利]一種氣管內(nèi)霧化致豚鼠主動全身過敏模型的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710120978.5
• 申請日: 2017-03-02
• 公開（公告）號: CN106859812A
• 公開（公告）日: 2017-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 谷舒怡;唐黎明;航艾;王巧旭;盛云華;寧煉;周謖;朱鴻雁;嚴(yán)佳捷;王涵
• 申請（專利權(quán)）人: 上海市食品藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號: A61D7/04
• 分類號: A61D7/04
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所31272
• 代理人: 竺路玲

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種實(shí)驗(yàn)動物過敏模型的制備方法，尤其涉及一種氣管內(nèi)霧化致豚鼠主動全身過敏模型的制備方法。

背景技術(shù)

肺部給藥由于藥物直接以較高濃度到達(dá)肺部靶器官，作用直接，起效迅速，且用藥量少，能有效減少全身給藥所產(chǎn)生的不良反應(yīng)，是治療呼吸系統(tǒng)疾病或全身疾病理想的給藥途徑，在臨床上應(yīng)用已久。因此經(jīng)呼吸道給藥或通過呼吸道染毒是針對吸入制劑藥效及進(jìn)行安全性評價(jià)不可或缺的手段。目前，針對臨床常用的水霧劑或粉霧劑等吸入制劑的安全性研究較為缺乏，多采用口鼻暴露和全身暴露，此種方法雖然無創(chuàng)但無法精確定量給藥劑量，藥物容易沉降于暴露塔內(nèi)損耗較大，另一方面相關(guān)儀器及配套發(fā)生器價(jià)格不菲。傳統(tǒng)暴露式氣管插管方式需手術(shù)暴露氣管，不適于長期給藥。由此可見針對吸入制劑的安全性評價(jià)需要開創(chuàng)一種無創(chuàng)且精確的給藥方式。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)中的上述問題提出的一種精確定量且無浪費(fèi)的氣管內(nèi)霧化致豚鼠主動全身過敏模型的制備方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)措施為：

一種氣管內(nèi)霧化致豚鼠主動全身過敏模型的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，借助喉鏡使用霧化針頭經(jīng)氣管內(nèi)插管，霧化給予卵白蛋白，隔日一次，共三次，使豚鼠致敏；

步驟二，在所述步驟一末次致敏后第14和21天，分別經(jīng)氣管內(nèi)霧化給予卵白蛋白，從而激發(fā)豚鼠產(chǎn)生主動全身過敏，即得豚鼠主動全身過敏模型。

為了優(yōu)化上述制備方法，本發(fā)明所采取的技術(shù)措施還包括：

進(jìn)一步地，所述步驟一為采用MicroSprayer霧化針頭經(jīng)氣管內(nèi)插管，霧化給予卵白蛋白生理鹽水溶液；所述步驟一中霧化給予卵白蛋白生理鹽水溶液中卵白蛋白濃度為1～4mg/ml，更優(yōu)選為2mg/ml；霧化給予卵白蛋白生理鹽水溶液的劑量為0.2-0.8ml，更優(yōu)選為0.5ml。

進(jìn)一步地，所述步驟二為在步驟一末次致敏后第14和21天，采用MicroSprayer霧化針頭經(jīng)氣管內(nèi)插管霧化給予卵白蛋白生理鹽水溶液。

進(jìn)一步地，所述步驟二中霧化給予卵白蛋白生理鹽水溶液中卵白蛋白濃度為2～6mg/ml，更優(yōu)選為4mg/ml；霧化給予卵白蛋白生理鹽水溶液的劑量為0.2-1.0ml，更優(yōu)選為0.5ml。

同時(shí)，本發(fā)明還可以采用HRH-MAG6型粉塵霧化針頭實(shí)施，故步驟一為采用HRH-MAG6型粉塵霧化針頭經(jīng)氣管內(nèi)插管，霧化給予卵白蛋白干粉。

進(jìn)一步地，所述步驟一中霧化給予卵白蛋白干粉的劑量為1～3mg/只，更優(yōu)選為2mg/只。

進(jìn)一步地，所述步驟二為在步驟一末次致敏后第14和21天，采用HRH-MAG6型粉塵霧化針頭經(jīng)氣管內(nèi)插管霧化給予卵白蛋白干粉；所述步驟二中霧化給予卵白蛋白干粉的劑量為2-6mg/只，更優(yōu)選為4mg/只。

本發(fā)明中實(shí)施氣管內(nèi)插管給予霧化時(shí)，借助小動物喉鏡在視野內(nèi)暴露會咽部位，將霧化針頭插入氣管中，快速并用力推注注射器針芯，使液體呈霧狀。注意操作時(shí)動作輕柔、迅速，所有器械注意及時(shí)消毒。

本發(fā)明采用上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下技術(shù)效果：

本方法動物處于清醒狀態(tài)，避免手術(shù)創(chuàng)傷，模擬吸入制劑進(jìn)入動物氣管內(nèi)給藥，靶器官唯一，針對性強(qiáng)，重復(fù)性好。而且該法可以精確定量藥物進(jìn)入呼吸道是否引起過敏，同時(shí)沒有多余藥物浪費(fèi)。實(shí)驗(yàn)證明效果良好，以氣管內(nèi)霧化OVA生理鹽水溶液進(jìn)行致敏激發(fā)，成功地誘發(fā)了豚鼠主動全身過敏癥狀，建立了豚鼠主動全身過敏模型。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明提供了一種氣管內(nèi)霧化致豚鼠主動全身過敏模型的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，借助喉鏡使用霧化針頭經(jīng)氣管內(nèi)插管，霧化給予卵白蛋白，隔日一次，共三次，使豚鼠致敏；

步驟二，在所述步驟一末次致敏后第14和21天，分別經(jīng)氣管內(nèi)霧化給予卵白蛋白，從而激發(fā)豚鼠產(chǎn)生主動全身過敏，即得豚鼠主動全身過敏模型。

下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)和具體的介紹，以使更好的理解本發(fā)明，但是下述實(shí)施例并不限制本發(fā)明范圍。

實(shí)施例1氣管內(nèi)霧化制備豚鼠主動全身過敏模型

實(shí)驗(yàn)動物：

采用豚鼠16只，雌雄各半。Hartley，SPF級，體重300～350g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司。

實(shí)驗(yàn)用卵白蛋白(OVA)：

購買自SIGMA公司，氯化鈉注射液購買自華裕(無錫)制藥有限公司。

飼養(yǎng)環(huán)境：