[發明專利]一種胃癌監測試劑盒及其使用方法

有效

• 申請號: 201710120659.4
• 申請日: 2017-03-02
• 公開（公告）號: CN106950380B
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發明（設計）人: 陳翠英
• 申請（專利權）人: 江蘇先思達生物科技有限公司;先思達（南京）生物科技有限公司;常州吉泰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產權代理有限公司 11467
• 代理人: 王金雙

本發明提供了一種胃癌監測試劑盒及其使用方法，該試劑盒包括：試劑A：濃度為10mM的碳酸氫銨溶液中加入5%的SDS配制而成；試劑B：濃度為10%NP40中加入不少于2.4單位/μL糖苷外切酶配制而成；試劑C：等體積20mM APTS的1.2M檸檬酸和2M有機物還原劑的DMSO的混合液；試劑D：0.5μL濃度為100mM、pH 5.6的NH₄AC，0.2μL的唾液酸酶，2.50μL雙氧水。該試劑盒基于檢測血液糖蛋白中寡糖鏈的指紋圖譜作為診斷指標對胃癌患者進行了評估，以診斷胃癌的腫瘤分期。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種胃癌監測試劑盒及其使用方法。

背景技術

胃癌是一種惡性的腫瘤疾病威脅著全球人類的健康，雖然近幾十年以來胃癌的發生率總體呈現降低趨勢，但在所有癌癥中發生率仍占第二位，死亡率占第一位。全球范圍內男性的胃癌的發生率僅次于肺、前列腺癌和結直腸癌，占第四位；女性的胃癌發生率居第五位，排在乳腺癌、宮頸癌、結直腸癌和肺癌之后。從發病年齡分析，具有年輕化趨勢，年輕人胃癌發病率逐漸上升。從性別進行區別，男性患者多于女性，年輕患者中女性患者居多。我國胃癌患者現狀呈現“三高三低”的特點，即發病率、轉移率、死亡率高；早診率、根治性切除率、5年生存率低。根據WanqingChen等人的研究統計發現，從2000年到2011年期間，雖然胃癌的發生率和死亡率呈現降低的趨勢，但男性的胃癌發生率仍然占所有癌癥的第二位，死亡率占第三位，女性的胃癌發生率雖然只占所有癌癥的第五位，但死亡率卻占第二位。

胃癌的病理分型是以組織形態結構和細胞生物學特性為基礎，不同類型的胃癌，其形態結構和生物學行為各異，流行病學和分子機制亦不同，以致于現有的胃癌病理分型系統眾多。隨著科學技術的不斷發展，對胃癌的認識也逐步加深，從最初組織形態研究胃癌到目前從分子水平研究胃癌，同時胃癌的分型也隨著發生不斷變化，從大體形態分型到組織分型再到基于環境、遺傳和流行病學分型，到基因分型。目前最主要最常見的是Lauren分型和WHO分型。

目前出現的胃癌診斷試劑盒都是檢測一些常見的腫瘤標記物，靈敏性及準確性都偏低。原因主要是選定的腫瘤標記物單項檢測往往有很大的局限性，難以滿足快速診斷的要求。

糖蛋白分子由多肽鏈和糖兩部分組成。血清糖蛋白中的任何變化可以反映人體的生理改變。近年來的糖組學研究也顯示了寡糖鏈的改變與各種腫瘤的發生和發展有密切的相關性（參考文獻：Liu，X-E，Desmyter，L，Gao，C-F，Laroy， W，Dewaele，S，Vanhooren，V，Wang，L，Zhuang，H，Callewaert，N，Libert，C，Contreras，R，Chen，C.N-Glycomic changesin hepatocellμLar carcinoma patients with liver cirrhosisinduced by hepatitisB virus.Hepatology，46，1426-1435，2007.）。

鑒于胃癌監測的不確定性，目前迫切需要一種能有效監測胃癌的試劑和監測評估方法。

發明內容

解決的技術問題：本發明的目的是解決現有檢測方法對胃癌監測的不確定性，提供一種胃癌監測試劑盒及其使用方法，通過檢測血液糖蛋白的糖苷鍵連接的碳水化合物（寡糖）含量的改變來評估胃癌的進展以及愈后腫瘤的復發。

技術方案：一種胃癌監測試劑盒，由以下試劑組成：

試劑A：濃度為10mM的碳酸氫銨溶液中加入質量濃度5%的SDS配制而成；

試劑B：質量濃度為10% NP40中加入不少于2.4單位/μL 糖苷外切酶配制而成；

試劑C：等體積20mM APTS的1.2M 檸檬酸和 2M有機物還原劑的DMSO的混合液；