[發明專利]一種表達載體及其在培育轉基因植物中的應用

有效

• 申請號: 201710120017.4
• 申請日: 2017-03-02
• 公開（公告）號: CN106868039B
• 公開（公告）日: 2019-11-29
• 發明（設計）人: 葉武威;陳修貴;陸許可;舒娜;王德龍;王俊娟;王帥;樊偉莉;郭麗雪;郭曉寧
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 11245 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關暢;何葉喧<國際申請>=<國際公布>=

本發明公開了一種表達載體及其在培育轉基因植物中的應用。本發明所提供的表達載體包含表達盒甲和表達盒乙；所述表達盒甲的核苷酸序列如序列表中序列6所示；所述表達盒乙的核苷酸序列如序列表中序列3所示。實驗證明，將本發明所提供的表達載體導入野生型擬南芥中，得到轉基因擬南芥。與野生型擬南芥相比，轉基因擬南芥的抗逆性顯著增強。因此，本發明具有重要的應用價值。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種表達載體及其在培育轉基因植物中的應用。

背景技術

土壤鹽漬化是限制農業生產的一個全球性問題，全世界鹽堿地的面積已達9.5億公頃，其中我國就有3665萬公頃，而且由于耕地的次生鹽漬化，鹽漬土地面積還在不斷增加。我國鹽堿土壤的形成，大部分與土壤中碳酸鹽的積累有關，因此堿化程度普遍較高，嚴重的鹽堿土壤地區植物幾乎不能生存。隨著世界人口的急劇增加以及耕地面積的日益減少，開發利用大面積存在的鹽堿地也變得愈發重要。

目前，人們主要通過以下兩種方式來開發鹽堿地：一是通過合理灌溉、淡水沖洗、施用化學改良藥劑來改良土壤，為植物生長創造適宜環境；二是培育耐鹽植物新品種以適應鹽漬環境，達到開發利用鹽堿地的目的。實踐證明，第一種方法成本高，效果也不理想，雖有一定進展但也有其難以避免的缺點，比如土壤改良效果不持久、工程費用昂貴、淡水沖洗同時流失土壤養分，以及淡水資源匱乏等。而培育耐鹽植物品種具有更為廣泛的應用前景，也是開發利用大面積的鹽漬土地資源的重要途徑之一。隨著植物耐鹽相關基因的發掘和植物基因工程技術的快速發展，利用轉基因技術增強植物的耐鹽性越來越受到育種科研工作者的重視。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何培育抗逆性增強的轉基因植物。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了一種表達載體。

本發明所提供的表達載體，可包含表達盒甲和表達盒乙；所述表達盒甲依次可包括如下元件：啟動子甲、編碼GhSOS1蛋白的核酸分子和終止序列甲；所述表達盒乙依次可包括如下元件：啟動子乙、編碼GhNHX1蛋白的核酸分子和終止序列乙。

上述表達載體中，所述GhSOS1蛋白可為a1)或a2)或a3)：

a1)氨基酸序列是序列表中序列5所示的蛋白質；

a2)在a1)的N端和/或C端連接標簽得到的融合蛋白質；

a3)將序列表中序列5所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白質；

上述表達載體中，所述GhNHX1蛋白可為b1)或b2)或b3)：

b1)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白質；

b2)在b1)的N端和/或C端連接標簽得到的融合蛋白質；

b3)將序列表中序列4所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白質。

所述a3)或所述b3)中，所述“經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加”可為經過10個以下氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加。

上述表達載體中，所述“編碼GhSOS1蛋白的核酸分子”可為如下c1)或c2)或c3)或c4)所示的DNA分子：

c1)編碼區如序列表中序列2所示的DNA分子；

c2)核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子；

c3)與c1)或(c2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且編碼所述GhSOS1蛋白的DNA分子；

c4)在嚴格條件下與c1)或c2)限定的核苷酸序列雜交，且編碼所述GhSOS1蛋白的DNA分子。