[發明專利]一種檢測北美H3N8亞型犬流感病毒的引物組及其應用

有效

• 申請號: 201710119861.5
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN106636475B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 蒲娟;宋晶偉;孫洪磊;王晨曦;張谞霄;劉金華
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

本發明公開了一種檢測北美H3N8亞型犬流感病毒的引物組及其應用。本發明提供了一種引物組，包括引物對甲和引物對乙；所述引物對甲由引物F1和引物R1組成；所述引物對乙由引物F2和引物R2組成；引物F1如序列1所示；引物R1如序列2所示；引物F2如序列3所示；引物R2如序列4所示。所述引物組的用途為如下(c1)輔助鑒定北美H3N8亞型犬流感病毒；(c2)輔助鑒定待測樣本中是否含有北美H3N8亞型犬流感病毒。采用本發明提供的引物組進行檢測，特異性好、敏感性高，只需要4?5小時的時間即可對臨床樣品進行檢測，操作簡單、容易推廣，便于基層操作和應用，對于北美H3N8亞型犬流感病毒疫病診斷和流行病學調查具有重大的應用價值。

技術領域

本發明涉及一種檢測北美H3N8亞型犬流感病毒的引物組及其應用。

背景技術

近年來，甲型流感病毒感染犬的報道不斷出現，包括H3N8亞型流感病毒、H3N2亞型流感病毒、H5N1亞型流感病毒和H1N1亞型流感病毒，美國、英國、澳大利亞等國家均有H3N8亞型犬流感病毒疫情的報道。H3N8亞型犬流感病毒能夠在犬中有效傳播，引起發熱、咳嗽、流鼻涕等流感樣癥狀，嚴重的引起犬出血性肺炎并導致死亡。

目前，中國尚未有犬感染北美H3N8亞型犬流感病毒的報道。隨著近幾年寵物市場擴展，以及各國警犬、軍犬引種工作的日益頻繁，這增加了北美H3N8亞型犬流感病毒傳入中國的可能，因此，需要建立一種針對北美H3N8亞型犬流感病毒的快速檢測方法。

現有北美H3N8亞型犬流感病毒的鑒定方法為血凝抑制試驗。血凝抑制試驗涉及到病原的分離，操作相對繁瑣，且各亞型之間容易相互影響，敏感性較低，耗時耗力。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測北美H3N8亞型犬流感病毒的引物組及其應用。

本發明首先提供了一種引物組，包括引物對甲和引物對乙；所述引物對甲由引物F1和引物R1組成；所述引物對乙由引物F2和引物R2組成。

所述引物F1為如下(a1)或(a2)：

(a1)序列表的序列1所示的單鏈DNA分子；

(a2)將序列1經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列1具有相同功能的DNA分子；

所述引物R1為如下(a3)或(a4)：

(a3)序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；

(a4)將序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列2具有相同功能的DNA分子。

所述引物F2為如下(b1)或(b2)：

(b1)序列表的序列3所示的單鏈DNA分子；

(b2)將序列3經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列3具有相同功能的DNA分子；

所述引物R2為如下(b3)或(b4)：

(b3)序列表的序列4所示的單鏈DNA分子；

(b4)將序列4經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列4具有相同功能的DNA分子。

本發明還保護一種特異引物對，為所述引物對甲或所述引物對乙。

所述引物組或所述特異引物對的用途為如下(c1)輔助鑒定北美H3N8亞型犬流感病毒；(c2)輔助鑒定待測樣本中是否含有北美H3N8亞型犬流感病毒。

本發明還保護所述引物組或所述特異引物對在制備試劑盒中的應用；所述試劑盒的用途為如下(c1)或(c2)：(c1)輔助鑒定北美H3N8亞型犬流感病毒；(c2)輔助鑒定待測樣本中是否含有北美H3N8亞型犬流感病毒。