[發(fā)明專利]一種基于適配體的金@DTNB@銀納米三角的真菌毒素檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710119555.1
• 申請(qǐng)日: 2017-03-02
• 公開（公告）號(hào): CN106970064B
• 公開（公告）日: 2019-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳全勝;楊明秀;李歡歡;歐陽(yáng)琴;郭志明;孫浩;劉妍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/65
• 分類號(hào): G01N21/65;B82Y30/00;B82Y40/00;B82Y5/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種基于適配體的金@DTNB@銀納米三角的真菌毒素檢測(cè)方法，其特征在于，該方法包括如下具體步驟：

步驟1)真菌毒素適配體修飾的金@DTNB@銀納米三角的制備：采用三步金種子誘導(dǎo)法合成粒徑均一的金納米三角，在已合成的金納米三角表面通過(guò)靜電吸附作用修飾DTNB拉曼信號(hào)分子，進(jìn)一步通過(guò)調(diào)控加入硝酸銀的量來(lái)制備合適銀殼層厚度的金@DTNB@銀納米三角，用三(2-氯乙基)磷酸酯活化巰基修飾的真菌毒素適配體，然后將其通過(guò)Au-S鍵連接到金@DTNB@銀納米三角上，得到真菌毒素檢測(cè)信號(hào)放大探針；

步驟2)真菌毒素適配體修飾的殼聚糖四氧化三鐵磁性材料的制備：采用溶劑熱法合成殼聚糖四氧化三鐵磁性材料，殼聚糖含有大量的氨基，使磁性材料表面含有氨基，通過(guò)戊二醛交聯(lián)法將氨基修飾的適配體連接到殼聚糖四氧化三鐵磁性材料表面，得到真菌毒素檢測(cè)捕獲探針；

步驟3)表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)體系的構(gòu)建：首先將100μL不同濃度的真菌毒素加入到100μL步驟1)得到的真菌毒素檢測(cè)信號(hào)放大探針中，室溫下孵育2h，向溶液中加入200μL步驟2)得到的真菌毒素檢測(cè)捕獲探針，繼續(xù)孵育6h，磁分離去除上清液，沉淀重新分散到100μL，Tris-HCl緩沖溶液中，用拉曼光譜儀在780nm激光激發(fā)下采集不同濃度真菌毒素組裝體系的拉曼信號(hào)，從而建立組裝體系拉曼信號(hào)強(qiáng)度和對(duì)應(yīng)真菌毒素濃度間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于適配體的金@DTNB@銀納米三角的真菌毒素檢測(cè)方法，其特征在于，金納米三角的制備：采用三步金種子誘導(dǎo)法合成粒徑均一的金納米三角，金種子溶液合成后室溫下放置3h，除去過(guò)量的硼氫化鈉再進(jìn)行下一步的金納米三角的生長(zhǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于適配體的金@DTNB@銀納米三角的真菌毒素檢測(cè)方法，其特征在于在金種子溶液和生長(zhǎng)溶液中快速加入碘化鈉來(lái)增加金納米三角的產(chǎn)率，通過(guò)在每40mL金納米三角溶液中加入6mL，25％質(zhì)量分?jǐn)?shù)的DTAC來(lái)純化金納米三角。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于適配體的金@DTNB@銀納米三角的真菌毒素檢測(cè)方法，其特征在于，金@DTNB@銀納米三角的制備，將銀殼層包覆在金納米三角外，銀殼層厚度為10±5nm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的一種基于適配體的金@DTNB@銀納米三角的真菌毒素檢測(cè)方法，其特征在于，表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)體系的構(gòu)建：在100μL真菌毒素適配體修飾的殼聚糖四氧化三鐵磁性材料中加入100μL不同濃度的真菌毒素，室溫下孵育2h，反應(yīng)結(jié)束后，加入上述合成的真菌毒素適配體鏈修飾的金@DTNB@銀納米三角溶液200μL，充分混合后室溫下孵育6h，磁分離去除上清液，沉淀重新分散到100μL，Tris-HCl緩沖溶液中；用拉曼光譜儀在780nm激光激發(fā)下采集不同真菌毒素濃度組裝體系的拉曼信號(hào)，從而建立了組裝體系拉曼信號(hào)強(qiáng)度和對(duì)應(yīng)真菌毒素濃度間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。