[發(fā)明專利]一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法

在審

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• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN106770264A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設計）人: 劉愛林;彭花萍;胡祥光;李珊紅;連芯;雷云;陳偉;林新華
• 申請（專利權）人: 福建醫(yī)科大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司35208
• 代理人: 王義星

技術領域

本發(fā)明涉及一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法，屬于檢測技術領域，涉及一種用于血清中葡萄糖檢測的微流控芯片。

背景技術

微流控芯片技術（Lab on a Chip）是將實驗室的各種功能整合于一塊幾平方厘米的芯片上，具有多學科、多領域交叉功能，是一間能隨身攜帶的綜合性實驗室。近年來，隨著科學技術的發(fā)展，微流控芯片技術已成為一種重要的分析檢測工具。紙基微流控芯片因具有成本低廉、操作性強、生物兼容性好、微型化、便攜式的現場快速檢測優(yōu)勢，將在醫(yī)學快速診斷、食品安全快速檢測以及環(huán)境質量快速監(jiān)控等領域具有巨大潛在應用價值。

葡萄糖含量是衡量新陳代謝能力和監(jiān)控疾病病情狀況的重要指標，尤其是血糖濃度的實時檢測對糖尿病患者病情預防、治療監(jiān)控和預后評估的重要手段。目前，對葡萄糖含量的檢測技術已經日趨成熟。主要方法有高效液相色譜法、分光光度法、臨床血糖生化儀等。但這些技術均存在分析速度較慢、成本較高、現場即時檢測較難等一定的局限性。因此，建立快速簡單、經濟準確、現場即時監(jiān)測的葡萄糖檢測方法一直是研究工作者關注的熱點。

本發(fā)明公開一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法，利用氧化鉬量子點模擬酶優(yōu)良的特性，結合紙基微流控芯片技術，及葡萄糖氧化酶對葡萄糖專一性地催化反應，將MoOx QDs-ABTS-H₂O₂ 顯色體系集成在紙芯片上反應，建立了快速簡便、經濟準確的葡萄糖檢測紙基微流控芯片新技術，并用于血清中葡萄糖的定量分析。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法。

本發(fā)明的目的是這樣實現的，所述的一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法，其特征在于，該紙微流控芯片以濾紙為基底，通過氧化鉬量子點模擬酶比色法來檢測葡萄糖。

所述的一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法，其特征在于，葡萄糖氧化酶催化葡萄糖產生H₂O₂，利用MoO₃、ABTS和H₂O₂顯色體系，實現對葡萄糖的定量檢測。

所述的一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法，其特征在于，包括如下步驟:

(1)MoOx量子點的合成

將MoS₂通過超聲，抽濾和水熱反應后得到的濾液，即得氧化鉬量子點（MoOxQDs）溶液；

（2）葡萄糖氧化酶與葡萄糖反應

配制一系列濃度的葡萄糖標準溶液，將1.25U葡萄糖氧化酶加入到不同濃度葡萄糖標準溶液中，室溫下酶反應15min后，反應后產生H₂O₂溶液；

（3）紙微流控芯片的葡萄糖測定

將步驟（2）得到的H₂O₂溶液滴涂到紙微流控芯片上，使MoOx QDs-ABTS-H₂O₂ 顯色體系集成在紙微流控芯片上反應，用拍照采集顏色變化圖像，ImageJ軟件對顏色變化的灰度值數據處理，檢測葡萄糖。

本發(fā)明所述的一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測血清中葡萄糖的方法，包括如下步驟:

取一定量血清標本于超濾管中，10000 rpm離心10 min，除去血清中大分子物質，取離心后的分析液， 1.25U葡萄糖氧化酶加入到不同濃度血清標準溶液中，室溫下酶反應15min后,得到所需的H₂O₂溶液，將得到的H₂O₂溶液滴涂到紙微流控芯片上，使MoOx QDs-ABTS-H₂O₂顯色體系集成在紙微流控芯片上反應，用拍照采集顏色變化圖像，ImageJ軟件對顏色變化的灰度值數據處理，檢測葡萄糖。

所述的一種基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測葡萄糖的方法或基于紙微流控芯片的納米氧化鉬模擬酶檢測血清中葡萄糖的方法，其特征在于，隨著葡萄糖濃度增加，顯色體系吸收值逐漸增大，在1mM_~20mM范圍內，葡萄糖濃度與吸收值（Abs）呈良好的線性相關，線性回歸方程為A=2.60744C_葡萄糖-3.31536，R² = 0.99523，檢測限為0.9 mmol/L。