[發明專利]一種檢測動物內臟中頭孢菌素類藥物殘留的方法及其樣品前處理方法

有效

• 申請號: 201710118138.5
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN106885854B
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發明（設計）人: 崔鳳云;李建輝;郝欣;暢曉暉;齊鶴鳴;嚴華;張朝暉;何悅;劉陽晴雪;許翔
• 申請（專利權）人: 北京出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08;G01N30/14
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹;張文祎

本發明公開了一種檢測動物內臟中20種頭孢菌素類藥物殘留的方法及其樣品前處理方法。前處理方法包括：(1)取待檢測樣品，加入提取溶劑對所述待測樣品進行提??；(2)離心得上清液；(3)取所述上清液加載到固相萃取小柱上凈化，收集得第一流出液；(4)待第一流出液收集完畢，再取提取溶劑加載到所述固相萃取小柱上，收集得第二流出液，合并全部流出液；(5)將所述全部流出液經濃縮、復溶和過濾步驟，得到待測樣液。本發明還公開了樣品經前處理后通過液?質聯用檢測頭孢菌素殘留的方法。該方法具有快速、高效、檢出限低、重現性好的特點，適于對抗生素的痕量檢測。

技術領域

本發明屬于食品檢測領域，具體涉及一種檢測動物內臟中頭孢菌素類藥物殘留的方法，以及適用的樣品前處理方法。

背景技術

頭孢菌素類抗生素是一類具有β-內酰胺環的半合成抗生素，自20世紀60年代初發明以來，由于其具有抗菌譜廣、抗菌力強、毒副作用小、過敏反應少等特點，是目前世界上應用最為廣泛，且發展最為迅速的一類抗感染藥物，現已有第1至第4代頭孢菌素類藥物共60多種，被廣泛應用于國內外臨床。同時一些頭孢類抗生素也逐步用于獸藥中，用其治療呼吸疾病、細菌感染等，從而不可避免地引起動物組織或其產品中的殘留，對人類健康造成危害。目前，該類藥物在動物源食品中的殘留問題已引起了各國高度重視，中國、日本、美國、歐盟等國都已規定了動物源性食品中頭孢菌素類藥物殘留的最大殘留限量，嚴格控制頭孢菌素類抗生素在畜牧業中的應用。其中日本最為嚴格，對動物肌肉組織中7種頭孢菌素類藥物(頭孢匹林、頭孢噻呋、頭孢氨芐、頭孢洛寧、頭孢唑林、頭孢喹諾、頭孢呋辛)制定了最高殘留限量，我國也規定了3種頭孢類藥物的最高殘留限量。為滿足進出口貿易中日趨嚴格的殘留限量檢測要求，具備一種高效、準確、靈敏度高的頭孢類藥物殘留檢測的方法尤為必要。

目前，國內外對動物源食品中頭孢類抗生素的檢測技術已有少量報道，但仍存在一些不足。一是涵蓋頭孢種類較少，在現有的國內外文獻中β-內酰胺類抗生素的檢測方法多針對青霉素類,頭孢類定量分析方法很少,且不成體系，只能同時檢測頭孢氨芐、頭孢匹林、頭孢唑林等少數幾種頭孢藥物殘留，不能滿足對多種頭孢類藥物同時檢測的實際需求。二是涉及的樣品基質簡單，多集中在動物肌肉組織或牛奶中頭孢類殘留的測定，對于基質復雜的動物內臟組織少有涉及。三是現有的頭孢類藥物檢測方法中樣品前處理步驟復雜，時間過長，尤其是在內臟組織中一些頭孢類化合物易降解為代謝物，從而導致待測化合物回收率偏低。因此，亟需開發出一種快速檢測頭孢類藥物的樣品前處理方法，尤其是適用于液-質聯用檢測的高效靈敏的樣品前處理的方法，以滿足日趨嚴格的頭孢類藥物殘留限量檢測要求。

發明內容

本發明的目的在于現有技術中對動物源食品中頭孢菌素類藥物進行檢測時采用的樣品前處理方法耗時長、涵蓋頭孢種類較少、基質單一，進而提供一種適用于同時、快速檢測動物內臟中20種頭孢菌素類化合物的樣品前處理方法，尤其是適用于液-質聯用檢測的樣品前處理方法。

本發明的另一個目的在于提供一種能夠快速檢測出動物內臟中頭孢菌素類藥物的方法。

為達到上述目的，本發明是通過以下技術方案實現的：

本發明提供了一種檢測動物內臟中20種頭孢菌素類藥物殘留的樣品前處理方法，其包括下述步驟：

(1)取待檢測樣品，加入提取溶劑對所述待測樣品進行提取，所述提取溶劑為乙腈和水的混合溶液；

(2)離心，得上清液；

(3)取上清液加載到固相萃取小柱上凈化，收集得第一流出液；所述固相萃取小柱為PRiME HLB固相萃取小柱；

(4)待第一流出液收集完畢，再取所述提取溶劑加載到所述固相萃取小柱上，收集得第二流出液，合并全部流出液；

(5)將所述全部流出液經濃縮、復溶和過濾步驟，得到待測樣液。