[發(fā)明專利]花生出仁率主效QTL位點(diǎn)的分子標(biāo)記及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710117881.9
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN108374053B
• 公開（公告）日: 2019-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅懷勇;任小平;黃莉;陳玉寧;周小靜;陳偉剛;姜慧芳
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 徐曉琴

1.與花生出仁率主效QTL位點(diǎn)cqSPA09連鎖的分子標(biāo)記在選育高出仁率花生品種中的應(yīng)用，所述分子標(biāo)記為分子標(biāo)記Ad09A7577、分子標(biāo)記AGGS1606、分子標(biāo)記AHGA98567和分子標(biāo)記Ad91I24；所述分子標(biāo)記Ad09A7577的引物對為：正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；所述分子標(biāo)記AGGS1606的引物對為：正向引物序列如SEQID NO.3所示，反向引物序列如SEQ ID NO.4所示；所述分子標(biāo)記AHGA98567的引物對為：正向引物序列如SEQ ID NO.5所示，反向引物序列如SEQ ID NO.6所示；所述分子標(biāo)記Ad91I24的引物對為：正向引物序列如SEQ ID NO.7所示，反向引物序列如SEQ ID NO.8所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，具體包括如下步驟：利用所述分子標(biāo)記Ad09A7577的引物對、分子標(biāo)記AGGS1606的引物對、分子標(biāo)記AHGA98567的引物對和分子標(biāo)記Ad91I24的引物對中的一對引物或多對引物，對待鑒定花生材料的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測，如電泳檢測結(jié)果顯示待鑒定材料與花生品種遠(yuǎn)雜9102擴(kuò)增得到相同大小的DNA片段，則標(biāo)志著出仁率主效QTL位點(diǎn)cqSPA09的存在，莢果具有較高的出仁率；所述擴(kuò)增得到相同大小的DNA片段是指：利用分子標(biāo)記Ad09A7577的引物對擴(kuò)增得到273bp DNA片段、利用分子標(biāo)記AGGS1606的引物對擴(kuò)增得到205bp DNA片段、利用分子標(biāo)記AHGA98567的引物對擴(kuò)增得到232bp DNA片段、利用分子標(biāo)記Ad91I24的引物對擴(kuò)增得到198bp DNA片段。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系為10μL，包括Trans 2×EcoTaq PCR SuperMix(+dye) 5μL、待鑒定花生材料的DNA模板10~20ng，0.4 μM正向引物，0.4 μM反向引物。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)條件為：94℃預(yù)變性3min；94℃變性30s，65℃復(fù)性45s、每個循環(huán)降低1℃，72℃延伸45s，共10個循環(huán)；94℃變性30s，55℃復(fù)性45s、72℃延伸45s，共30個循環(huán)；最后72℃延伸10min，4℃保溫。